簡介:諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測,上海國際旅行衛(wèi)生保健中心實(shí)驗(yàn)室章琪方筠王家棟TEL02162688086EMAILZHANGQSHCIQGOVCN,食源性急性胃腸炎綜述諾如病毒介紹案例介紹(一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測),第一部分食源性急性胃腸炎綜述,食源性急性胃腸炎流行現(xiàn)狀,SOURCEFOODBORNEOUTBREAKREPORTINGSYSTEMHTTP//WWWCDCGOV/FOODBORNEOUTBREAKS/,主要病原體,毒素介導(dǎo)(TOXINMEDIATED水樣便病毒諾如,輪狀,星狀,腺病毒細(xì)菌蠟樣芽孢桿菌,產(chǎn)氣莢膜梭菌,金黃色葡萄球菌,產(chǎn)腸毒素型大腸桿菌侵襲性病原體(INVASIVEMICROBES膿血便細(xì)菌大腸桿菌(侵襲性、致病性、出血性),沙門氏菌,空腸彎曲桿菌,志賀氏菌,艱難梭菌原蟲賈第鞭毛蟲,溶組織內(nèi)阿米巴滲透性病原體(PENETRATINGMICROBES系統(tǒng)感染細(xì)菌傷寒、副傷寒沙門氏菌,鼠疫桿菌,感染途徑,病人接觸諾如病毒、志賀氏菌、出血性大腸桿菌旅行大腸桿菌、沙門氏菌、賈第鞭毛蟲郵輪諾如病毒(CRUISESHIPVIRUS)動物接觸沙門氏菌,出血性大腸桿菌,賈第鞭毛蟲疫水隱孢子蟲,出血性大腸桿菌污染的食物沙門氏菌,致病性,感染劑量(病原體顆粒數(shù))隱孢子蟲10100志賀氏菌10100出血性大腸桿菌10100空腸彎曲桿菌104–106沙門氏菌105–108霍亂弧菌105–108產(chǎn)腸毒素型大腸桿菌108鼠疫桿菌109,SLUTSKERL,ETALANNINTERNMED199712650513,食源性急性胃腸炎的防控仍然是很大的挑戰(zhàn),諾如病毒10100,第二部分諾如病毒介紹,歷史,IN1929,ZAHORSKYPROPOSEDTHENAME“WINTERVOMITINGDISEASE”TODESCRIBESOUTBREAKSOFPRESUMEDVIRALGASTROENTERITISINTHE1940S,GORDONDEMONSTRATEDTHATPOOLEDSTOOLFILTRATESOBTAINEDFROMPATIENTSINANINSTITUTIONALOUTBREAKOFNONBACTERIALGASTROENTERITISCOULDINFECTINOCULATEDVOLUNTEERSIN1968,CDCINVESTIGATEDANOUTBREAKOFVOMITINGDISEASEINANELEMENTARYSCHOOLINNORWALKOH50OFSTUDENTSANDTEACHERSDEVELOPEDGASTROENTERITISKAPLANUSEDIMMUNEELECTRONMICROSCOPYTOIDENTIFYVIRALPARTICLESINTHESTOOLSOFVOLUNTEERSINFECTEDWITHTHE“NORWALK”STRAINVIRUSINITIALLYCLASSIFIEDASSMALLROUNDVIRUSES,LATERRECLASSIFIEDASCALICIVIRUSESWHENGENOMECLONED,DRALBERTKAPIKIAN1972,ELECTRONMICROSCOPYSMALLROUNDSTRUCTUREDVIRUSSRSV27NM,KAPIKIANAZ,ETALVISUALIZATIONBYIMMUNEELECTRONMICROSCOPYOFA27NMPARTICLEASSOCIATEDWITHACUTEINFECTIOUSNONBACTERIALGASTROENTERITISJVIROL,1972,10510751081,美國2006年諾如病毒引起的急性胃腸炎數(shù)量,流行現(xiàn)狀,自1995年我國報道首例諾如病毒感染以來,近年來在我國已有多起諾如病毒引起的急性胃腸炎暴發(fā)疫情的報道韓健康,沈建勇,姚文庭,等一起諾如病毒Ⅰ型Ⅱ型混合感染急性胃腸炎暴發(fā)疫情調(diào)查分析中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志,2008,224263265程慧健,袁輝,熊英,等一起諾如病毒感染性腹瀉暴發(fā)的調(diào)查中華流行病學(xué)雜志,2008,296627628鐘培松,王韶華,陳時千,等一起福利院諾瓦克病毒胃腸炎暴發(fā)調(diào)查中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2007,85621623林玫,劉巍,梁大斌,等諾如病毒引起的感染性腹瀉暴發(fā)疫情調(diào)查應(yīng)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2007,1311114,我國流行現(xiàn)狀,1996年和1997年分別在北京和太原開展的人群血清標(biāo)本中的諾瓦克樣病毒特異性IGG抗體檢測表明,北京市諾瓦克樣病毒抗體總檢出率為888%以上。太原市總檢出率在786%以上。19982002在福州地區(qū)用RTPCR方法對288份腹瀉患者糞便標(biāo)本諾瓦克樣病毒病原檢測顯示,諾瓦克樣病毒基因組I的陽性率為111%,主要是7歲以上兒童及成人;諾瓦克樣病毒基因組Ⅱ的陽性率為288%,主要是6月齡至3歲嬰幼兒。,我國流行現(xiàn)狀,基本特征,發(fā)病率高、致病劑量低、抵抗力強(qiáng),被WHO定為B類病原體;對加熱、低溫具有較強(qiáng)抵抗性(能耐受零度以下到60℃);對酸堿和去污劑等具有較強(qiáng)的抵抗性通常10PPM或10MG/L含氯去污劑處理30分鐘不能有效殺滅病原體);無法培養(yǎng),無有效小動物模型;型別眾多,無有效保護(hù)性抗體,常引起重復(fù)感染;復(fù)制機(jī)制還不清楚,無有效治療藥物及疫苗,病原學(xué),TAXONOMYFAMILYCALICIVIRIDAEGENUS1NORWALKLIKEVIRUSESNLVS2SAPPOROLIKEVIRUSESSLVSGENUSNOROVIRUSESFORMERLYNORWALKLIKEVIRUSESGENUSLAGOVIRUSRABBIT,HAREGENUSVESIVIRUSCAT,PIG,SEALION,OTHERGENUSNOROVIRUSHUMAN,BOVINE,SWINE,MOUSEGENUSSAPOVIRUSHUMAN,SWINE,VIRIONS3540NMNONENVELOPEDANDICOSAHEDRAL,GENOMESTRUCTURELINEARPOSITIVESENSERNAOF7477KB,,,,,,,,5,3,HEL,PRO,POL,ORF1,ORF2,ORF3,1,5,5358,5374,6950,6950,7588,7654,1789,530,212,,CAPSID,SOURCEGENBANKM87661,CLUSTERSDIFFERBY≥20AMINOACIDPAIRWISEDISTANCEGENOGROUPSDIFFERBY4455AMINOACIDPAIRWISEDISTANCE,病毒的分型(CAPSIDPROTEIN,1,病毒培養(yǎng),CELLCULTURENOHUMANSTRAINSANIMALMODELNOCHIMPANZEES,流行現(xiàn)狀CAUSESANESTIMATED23MILLIONINFECTIONSPERYEARINTHEUSCAUSES60OFILLNESSDUETOKNOWNACCOUNTSFOR7095OFGASTROENTERITISOUTBREAKS感染劑量10100VIRUSES傳播途徑FECALORALTRANSMISSIONSHEDDINGFORUPTO23WEEKSDROPLETTRANSMISSIONVIAINGESTIONOFAIRBORNEDROPLETSOFVIRUSCONTAININGPARTICLESCOMMONCAUSEOFTRAVELER’SDIARRHEAMAYCAUSECHRONICINFECTIONINTRANSPLANTRECIPIENTS,流行病學(xué),傳播途徑,糞口傳播PERSONTOPERSONFOODBORNEWATERBORNEMIXED空氣傳播VOMITUS污染物,傳播途徑分類,臨床癥狀,腹瀉86嘔吐78腹部疼痛或絞痛30惡心(無嘔吐)15嗜睡8發(fā)熱7肌肉疼痛7頭痛6頭暈4脫水4寒顫3喉嚨疼痛1鼻出血1,感染持續(xù)過程,病毒顆粒持續(xù)釋放過程,診斷,急性胃腸炎診斷標(biāo)準(zhǔn)(美國CDC標(biāo)準(zhǔn)腹瀉等于3次或者多于3次不成形糞便/24H嘔吐伴隨一種以下癥狀如1次或多次不成形便24/H、胃部不適、頭疼、肌肉疼痛和發(fā)燒。郵輪疫情的定義感染者通?!?郵輪總?cè)藬?shù)。,實(shí)驗(yàn)室檢測,一抗原檢測1972年首先通過免疫電鏡的方法發(fā)現(xiàn)NVS,因此該方法在很長一段時間內(nèi)成為檢測NVS的經(jīng)典方法。電鏡法包括常規(guī)電鏡(EM)、免疫電鏡(IEM)以及固相免疫電鏡(SPIEM)三種。直接電鏡法通過將糞便標(biāo)本重懸后離心,負(fù)染病毒顆粒后直接在鏡下觀察來尋找病毒。由于NVS病毒顆粒并不具備典型的杯狀病毒特征,且糞便中病毒滴度通常較低,給直接電鏡觀察帶來了很大困難,通常要求病毒的滴度達(dá)到106/G才能達(dá)到檢測要求。免疫電鏡的方法是將重懸離心分離得到的病毒顆粒與標(biāo)準(zhǔn)血清共孵育后再經(jīng)負(fù)染后在鏡下觀察來檢測病毒。盡管這種方法可以較好地濃縮病毒顆粒,但靈敏度仍然較低,對NVS檢測的陽性率只有20左右。固相免疫電鏡的方法是將特異性抗體直接包被載網(wǎng),同時加入蛋白A增加抗體與標(biāo)本中抗原結(jié)合的機(jī)會,從而提高檢測的靈敏度。上述三種方法都要求觀察者具有豐富的經(jīng)驗(yàn),同時,精密的檢測儀器、較大的勞動強(qiáng)度,都制約了該方法在NVS檢測中的應(yīng)用。,免疫學(xué)檢測(EIA)主要通過檢測標(biāo)本中的抗原來確認(rèn)諾如病毒。該方法操作簡單,實(shí)用性較強(qiáng),便于推廣。然而同樣由于NVS型別的多樣性,對該方法的應(yīng)用產(chǎn)生了限制。BRUIN等在2006年首次報告了對兩種新上市的商品化NVSEIA檢測試劑盒的評估結(jié)果。結(jié)果表明,與傳統(tǒng)的RTPCR方法相比,IDEIA和RIDASCREEN這兩個品牌的試劑盒對NVS的檢測靈敏度分別為38和36,特異性為96和88。之后的兩項(xiàng)評估結(jié)果雖然有提高,但靈敏度也僅在60?769和59?803之間。表明盡管對單個樣品的診斷可能還存在問題,但可應(yīng)用于NVS大規(guī)模暴發(fā)后的篩查。,二核酸檢測,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)RTPCR除了能更準(zhǔn)確、靈敏地檢測標(biāo)本中的諾瓦克病毒,尤其是低濃度的諾瓦克病毒感染外,最大的優(yōu)點(diǎn)在于可以進(jìn)一步對病毒進(jìn)行血清型和基因型的研究,不會受到獲得分型單克隆抗體的限制,對流行病學(xué)研究具有重要意義,是諾如病毒檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”。,SPECIMENPROCESSINGFAECESVIRALRECOVERYRNAEXTRACTIONGENERATECDNAFROMRNABYREVERSETRANSCRIPTIONPCRNOROVIRUSGENOGROUPIORIIIDENTIFIEDSEQUENCINGGENOTYPING,,,,,,實(shí)驗(yàn)流程,,第三部分一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測,基本情況介紹,2008年11月4日,上海出入境檢驗(yàn)檢疫局接某大型郵輪報告,該船載有乘客2664人,乘務(wù)人員1087人,自10月22日從泰國曼谷起航后,船上陸續(xù)發(fā)現(xiàn)急性胃腸炎感染病例。感染人數(shù)在11月2日和3日達(dá)到高峰,至11月4日已達(dá)285人(截止11月6日符合急性胃腸炎癥狀的病例達(dá)368人)。上海出入境檢驗(yàn)檢疫局在接到報告后迅速啟動緊急預(yù)案,多個部門通力合作,開展現(xiàn)場檢疫查驗(yàn)和流行病學(xué)調(diào)查,明確事件性質(zhì);實(shí)驗(yàn)室迅速開展急性胃腸炎相關(guān)病原的快速檢測,在收到樣品后3小時就初步確認(rèn)引起這次大規(guī)模急性胃腸炎的病原為諾如病毒。這是檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)首次在口岸確診大規(guī)模諾如病毒暴發(fā)疫情。,,UNPUBLISHEDRESULTSBYWANGJANDZHANGZ,實(shí)驗(yàn)室診斷處置依據(jù),上海國際旅行衛(wèi)生保健中心腹瀉病處置預(yù)案,診斷原則,首先排除檢疫傳染?。ɑ魜y)流行病學(xué)調(diào)查資料臨床癥狀其它相關(guān)資料,,確定檢測項(xiàng)目,檢測方法,排查方案(一),(一)輪狀病毒1.金標(biāo)法檢測輪狀病毒抗原試劑糞便輪狀病毒檢測試劑盒;試劑廠家法國VEDA公司;樣本糞便;時間30分鐘。2.ELISA法試劑輪狀病毒酶免檢測試劑盒;供應(yīng)商上海軒昊科技發(fā)展有限公司樣本糞便;時間2小時。3.熒光定量RTPCR法試劑輪狀病毒熒光定量RTPCR檢測試劑盒;單位中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所;樣本糞便;時間4小時。(二)諾如病毒1.ELISA法檢測病毒抗原試劑ENZYMEIMMUNOASSAYFORTHEDETECTIONOFNOROVIRUSINSTOOLSAMPLES;廠家RBIOPHARMAG;樣本糞便;時間4小時。2.半定量RTPCR法(本實(shí)驗(yàn)室)樣本糞便;時間6小時。,排查方案(二),結(jié)果,ELISA檢測結(jié)果,RTPCR檢測結(jié)果,TIPSFORSAMPLECELLECTION1最好采集水樣便或稀便;2最好采集發(fā)病4872小時之間的糞便樣本;3直腸拭子或嘔吐物標(biāo)本一般作參考,電鏡病毒顆粒觀察結(jié)果,磷鎢酸負(fù)染,40,000?電鏡觀察,檢測過程總結(jié),諾如病毒進(jìn)一步研究方向,快速檢測方法LATEX,LAMP,NASBA分子流行病學(xué)陸地海洋循環(huán)進(jìn)化規(guī)律消殺試劑,本次疫情處置的經(jīng)驗(yàn)得失,我國口岸首例,成功處置,找到病原體;鍛煉了隊伍,增強(qiáng)了職責(zé)、使命感,強(qiáng)化了疫情的觀念;為口岸衛(wèi)生檢疫科研的開展、技術(shù)的儲備明確了方向;各項(xiàng)細(xì)節(jié)有待完善,郵輪突發(fā)傳染病疫情相關(guān)動向,軍團(tuán)菌LEGIONELLASPECIESCOLONIZATIONOFWATERDISTRIBUTIONSYSTEMS,POOLSANDAIRCONDITIONINGSYSTEMSINCRUISESHIPSANDFERRIESBMCPUBLICHEALTH2008,8390流感病毒ALARGEOUTBREAKOFINFLUENZAAANDBONACRUISESHIPCAUSINGWIDESPREADMORBIDITYEPIDEMIOLINFECT2003,130226371LARGESUMMERTIMEINFLUENZAAOUTBREAKAMONGTOURISTSINALASKAANDTHEYUKONTERRITORYCLININFECTDIS2003,3691095102,THANKYOUFORYOURATTENTION,
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簡介:中國急性弛緩性麻痹病例監(jiān)測信息報告管理系統(tǒng),維持無脊灰主要工作,常規(guī)工作急性弛緩性麻痹病例監(jiān)測工作常規(guī)免疫工作強(qiáng)化免疫活動應(yīng)急事件的處理外環(huán)境脊灰病毒監(jiān)測項(xiàng)目脊灰病毒實(shí)驗(yàn)室封存,各級承擔(dān)監(jiān)測任務(wù)的醫(yī)院,,,,,,,,標(biāo)本采集,送省疾控中心,省實(shí)驗(yàn)室報告結(jié)果,國家脊灰實(shí)驗(yàn)室型內(nèi)鑒定結(jié)果,14天,7天,28天,7天,,陽性分離物送國家脊灰實(shí)驗(yàn)室,14天,監(jiān)測系統(tǒng)主要指標(biāo),AFP病例監(jiān)測系統(tǒng)歷史,1991年建立計算機(jī)網(wǎng)絡(luò)化,電子信箱數(shù)據(jù)管理2019年中國免疫規(guī)劃監(jiān)測信息管理系統(tǒng)運(yùn)行AFP監(jiān)測模塊進(jìn)行數(shù)據(jù)收集、個案管理2019年啟用AFP病例監(jiān)測信息報告管理系統(tǒng)數(shù)據(jù)實(shí)時共享及時性醫(yī)院網(wǎng)絡(luò)直報、縣級CDC進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)直報敏感性結(jié)合個案流調(diào)信息管理特異性與完整性,本年度AFP病例監(jiān)測質(zhì)量評價以中國免疫規(guī)劃監(jiān)測信息管理系統(tǒng)數(shù)據(jù)為準(zhǔn)2019年起不再通過中國免疫規(guī)劃監(jiān)測信息管理系統(tǒng)報告,2019年10月8日正式啟用,醫(yī)療機(jī)構(gòu)AFP病例報告方式,登陸“中國疾病預(yù)防控制信息系統(tǒng)”在“疾病監(jiān)測信息報告管理系統(tǒng)”疾病名稱的“其他傳染病”中選擇“9825,AFP”在“病例分類”中選擇“1臨床診斷病例”,填報AFP病例報告卡。填寫其他信息病例歸屬(本地、異地)、麻痹日期、麻痹癥狀、來現(xiàn)就診地日期、現(xiàn)就診地住址等,初報的AFP病例,均以【1臨床診斷病例】錄入,異地病例填寫內(nèi)容較本地病例多來現(xiàn)就診地日期和現(xiàn)就診地住址,疾控機(jī)構(gòu)AFP病例報告卡審核,縣級疾控機(jī)構(gòu)應(yīng)每日瀏覽轄區(qū)內(nèi)大疫情系統(tǒng)AFP病例報告情況,發(fā)現(xiàn)AFP病例報告后,應(yīng)立即與報告單位聯(lián)系核實(shí)如核實(shí)為誤報告,則按照大疫情要求,聯(lián)系報告單位刪除AFP病例報告卡。如確實(shí)不屬于誤報24小時內(nèi)審核并將AFP病例納入專病管理48小時內(nèi)開展個案調(diào)查調(diào)查開始后48小時內(nèi)填報流行病學(xué)信息并上傳及時填報標(biāo)本采集和病例隨訪信息,,,,,傳染病報告卡管理,個案流行病學(xué)調(diào)查、實(shí)驗(yàn)室檢測信息管理,接觸者及一般人群管理信息,AFP監(jiān)測指標(biāo)自動統(tǒng)計,AFP監(jiān)測信息報告管理系統(tǒng)界面,AFP病例報告發(fā)病率2019年1~43周,,全國共報告AFP病例4535例,報告發(fā)病率222/10萬報告發(fā)病率<1/10萬的省份有上海和西藏,,,,15歲以下人口≥10萬的地市中,7個未報告病例,28個報告發(fā)病率<1/10萬,AFP病例監(jiān)測信息反饋,免疫規(guī)劃工作簡報(每月)全國AFP病例監(jiān)測周報(每周五)全國傳染病與突發(fā)公共衛(wèi)生事件監(jiān)測日報免疫規(guī)劃工作快報,謝謝,,
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