自主神經遞質在乳鼠心房肌細胞Ca-L和KAch通道表達中的作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：
　　探討不同濃度的自主神經遞質去甲腎上腺素（NE）和乙酰膽堿（Ach））對乳鼠心房肌細胞L型鈣離子通道（Ca-L）和乙酰膽堿敏感性鉀通道（KAch）相關基因和蛋白表達的影響。
　　方法：
　　1天齡SD乳鼠，消化分離獲得心房肌細胞，培養(yǎng)24h后干預分組。分為低藥物濃度組、高藥物濃度組。兩藥物濃度組分別按如下方案各自分成5亞組。
　　（1）低濃度組：①對照組：不予干預，培養(yǎng)24h。②NE組：NE0.1μmo

2、l/L干預24h。③Ach組：Ach0.1μmol/L干預24h。④NE+Ach組：NE0.1μmol/L+Ach0.1μmol/L干預24h；⑤NE+Meto（美托洛爾）組：NE0.1μmol/L+Meto0.1μmol/L干預24h。
　?。?）高濃度組：①對照組：不予干預，培養(yǎng)72h。②NE組：NE10μmol/L干預72h。③Ach組：Ach10μmol/L干預72h。④NE+Ach組：NE10μmol/L+Ach10μm

3、ol/L干預72h。⑤NE+Meto組：NE10μmol/L+Meto10μmol/L干預72h。實時熒光定量逆轉錄PCR、免疫印跡（WB）檢測各組Cav1.2、Cav1.3、Kir3.1、Kir3.4 mRNA及蛋白表達水平。
　　結果：
　?。?）低濃度組：給予NE刺激24h后Cav1.2、Cav1.3 mRNA及蛋白表達上調，Kir3.1、Kir3.4 mRNA及蛋白表達下調；Ach刺激24h后Cav1.2、Cav1.

4、3 mRNA及蛋白表達下調，Kir3.1、Kir3.4 mRNA及蛋白表達上調；NE+Ach組與NE組比較，Cav1.2、Cav1.3 mRNA及蛋白表達下調，Kir3.1、Kir3.4 mRNA及蛋白表達上調；NE+Ach組與Ach組比較，Kir3.4 mRNA及蛋白表達下調；NE+Meto組與NE組比較，Meto干預后Cav1.2、Cav1.3 mRNA及蛋白表達下調，Kir3.1、Kir3.4 mRNA及蛋白表達上調。
　　

5、（2）高濃度組中：NE、Ach刺激72h后Cav1.2、Cav1.3、Kir3.1、Kir3.4 mRNA及蛋白均表達下調；NE+Ach組分別與NE組、Ach組比較，Kir3.1、Kir3.4蛋白表達均下調；NE+Meto組與NE組比較，Cav1.2、Cav1.3 mRNA及蛋白均表達上調，Kir3.1、Kir3.4蛋白表達下調。
　　結論：
　?。?）低濃度NE促進培養(yǎng)乳鼠心房肌細胞Cav1.2、Cav1.3基因和蛋白表達

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