IL-35在結節(jié)病發(fā)病機制中的研究.pdf

1、目的:先前研究已經發(fā)現(xiàn)，Treg/Th17失衡及Treg細胞免疫抑制功能缺陷是結節(jié)病發(fā)病的重要原因之一。IL-35作為Treg細胞免疫抑制功能的執(zhí)行者，通過促進Treg細胞增殖，抑制Th17分化并誘導iTr35細胞（分泌IL-35的Treg細胞亞群）生成發(fā)揮免疫抑制作用。推測結節(jié)病中Treg細胞的抑制功能缺陷和Treg/Th17失衡可能與IL-35分泌減少或其在細胞內信號傳導途徑異常有關。因此本研究將在先前研究基礎上明確結節(jié)病中合成和釋

2、放IL-35的細胞來源及其表達情況;探討IL-35在結節(jié)病的發(fā)病機制中可能發(fā)揮的生物學效應，此研究旨在探尋結節(jié)病的發(fā)病機制和尋找潛在的治療靶點。
　　方法:ELISA檢測結節(jié)病組(n=98)和正常對照組(n=98)血漿中IL-35的水平，Real-time PCR檢測結節(jié)病組和正常對照組IL-35兩個亞基EBI3和p35的表達水平，以及Treg細胞轉錄因子Foxp3的表達水平。Pearson相關分析結節(jié)病患者血漿中IL-35的水平

3、與臨床參數(shù)的相關性。選取初治結節(jié)病患者10例，健康對照者10例，采用流式細胞術檢測外周血中Treg細胞占CD4+T細胞的比例，IL-35在CD4+T細胞、CD8+T細胞、Treg細胞上的表達情況。
　　結果:結節(jié)病組血漿中IL-35的水平(43.56±11.77pg/mL)明顯低于正常對照組(55.18±11.53pg/mL)，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.001）。結節(jié)病治療組(n=57)較未治療組(n=41)血漿中IL-35的水

4、平明顯升高(47.38±12.02pg/mL vs40.82±10.89pg/mL;P=0.0059)，結節(jié)病患者血漿中IL-35水平與DLCO占預測值％成正相關（r=0.76，P＜0.001)，而與其他臨床參數(shù)未發(fā)現(xiàn)明顯相關性。結節(jié)病組EBI3和Foxp3基因mRNA的表達水平均明顯低于正常對照組(分別為P=0.0016，P=0.0391)，而p35基因mRNA的表達水平在兩組間無明顯差別（P=0.5816），結節(jié)病組和正常對照組EB

5、I3基因相對表達量與Foxp3基因相對表達量均成明顯正相關（分別為r=0.786，P＜0.001;r=0.730，P＜0.001)，p35與Foxp3基因相對表達量在結節(jié)病組成低度正相關（r=0.383，P=0.037），而在正常對照組兩基因表達無明顯相關性（r=0.208，P=0.271）。流式細胞術檢測發(fā)現(xiàn)，10例結節(jié)病患者外周血中Treg/CD4+T細胞的平均比例(5.82±0.51％)與健康對照者(5.71±0.90％)相比無顯

6、著差異（P=0.7413），在CD4+T細胞、CD8+T細胞和Treg細胞中均未發(fā)現(xiàn)表達IL-35的細胞。
　　結論:結節(jié)病患者血漿中IL-35水平較正常健康者明顯減低，且經激素和或免疫抑制劑治療后水平升高，提示IL-35可能參與了結節(jié)病的炎癥過程，在其發(fā)病過程中具有重要作用。結節(jié)病患者血漿中IL-35水平與DLCO占預測值％成正相關，提示其有可能作為預測結節(jié)病肺部病變進展的生物學指標。IL-35的一個亞基EBI3和Treg細胞轉

7、錄因子Foxp3的mRNA表達水平均明顯低于正常對照組，且EBI3、p35基因與Foxp3基因相對表達量成正相關，提示結節(jié)病患者外周血中Treg細胞數(shù)量的減少可能導致了EBI3、p35基因生成減少，以至于EBI3與p35形成的異源二聚體減少，最終合成IL-35減少。而本研究采用流式細胞術檢測人類T淋巴細胞亞群并未發(fā)現(xiàn)IL-35表達陽性的細胞，可能與人T淋巴細胞亞群中分泌IL-35的細胞數(shù)量太少有關，抑或IL-35可能主要由其它細胞亞群所