外源性硫化氫調(diào)節(jié)肺炎支原體LAMPs誘生血紅素氧合酶-1和促炎癥細胞因子.pdf

1、目的：觀察外源性硫化氫（H2S）對肺炎支原體（Mycoplasmapneumoniae,Mp）脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白（lipid-associated membrane proteins,LAMPs）誘導人單核細胞系THP-1分泌血紅素氧合酶-1（hemeoxygenase，HO-1）、白細胞介素6（interleukine6,IL-6）和白細胞介素8（interleukine6,IL-8）的影響，并探討其調(diào)控機制，為進一步研究Mp與宿主細胞相

2、互作用提供理論依據(jù)。
　　方法：體外培養(yǎng)Mp標準株M129，低溫高速離心收集菌體并提取Mp LAMPs，用BCA法測定其濃度。體外培養(yǎng)THP-1細胞，用5μg/mL Mp LAMPs刺激硫氫化鈉（sodium hydrosulfide,NaHS）預處理和未處理的THP-1細胞，ELISA檢測各組IL-6和IL-8的表達水平。Western blot檢測HO-1和細胞漿、細胞核內(nèi)核因子E2相關(guān)因子2（nuclear factor E

3、2-related factor2,Nrf2）的表達水平；用Mp LAMPs分別刺激NaHS、ERK抑制劑PD98059、p38抑制劑SB203580、JNK抑制劑SP600125和NF-κB特異性抑制PDTC預處理和未處理的的THP-1細胞，Western blot檢測ERK、p38、JNK及核因子κB（NF-κB）的抑制蛋白IκB-α（inhibitor of NF-κB,IκBα）的磷酸化蛋白和總蛋白。用LAMPs刺激用NaHS和

4、NF-κB特異性抑制PDTC預處理的THP-1細胞，ELISA檢測各組IL-6和IL-8的表達。
　　結(jié)果：
　?。?）Mp LAMPs刺激用NaHS預處理的THP-1細胞后，HO-1的表達量比NaHS未處理組細胞增加了41.18％。IL-6 和IL-8的分泌分別減少了19.02%、11.56%。
　?。?）LAMPs誘導的NaHS預處理THP-1細胞較LAMPs直接作用的細胞Nrf2在胞漿中表達減少了16.

5、67%，胞核內(nèi)表達增加了27%。
　　（3）Mp LAMPs刺激NaHS預處理和未處理的THP-1細胞后，NaHS處理組ERK、p38、JNK的磷酸化水平減少了27.14%、16.67%、31.00%，PD98059組、SB203580組、SP600125組分別被抑制了28%、42.5%、40.2%。
　　（4）NaHS預處理THP-1細胞使得Mp LAMPs誘導的IκB-α的磷酸化水平降低了17.65%；LAMPs刺激用N