IL-13Rα2對(duì)人肺成纖維細(xì)胞(HFL-1)TGF-β和膠原蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　IL-13是一種促纖維化細(xì)胞因子，有兩種結(jié)構(gòu)和功能截然不同的受體：IL-13Rα1和IL-13Rα2。IL-13Rα2有三種存在形式：細(xì)胞膜表面（mIL-13Rα2）、細(xì)胞內(nèi)以及可溶性形式（sIL-13Rα2），IL-13Rα2與IL-13有高度的親和力，但因其胞內(nèi)區(qū)很短在過(guò)去一直被看作是誘騙受體。有研究表明IL-13Rα2在肺纖維化體內(nèi)模型可以通過(guò)AP-1通路來(lái)介導(dǎo)TGF-β的產(chǎn)生從而發(fā)揮信號(hào)功能。本課題主要是探討I

2、L-13Rα2與TGF-β之間的關(guān)系，判斷IL-13Rα2是否發(fā)揮信號(hào)功能來(lái)介導(dǎo)肺成纖維細(xì)胞TGF-β的產(chǎn)生和膠原蛋白的形成。
　　方法：
　　用不同濃度的IL-13（0，10，20，50，100ng/ml）刺激HFL-1，通過(guò)qPCR檢測(cè)IL-13Rα1、IL-13Rα2和TGF-β的mRNA表達(dá)水平，用Western blot檢測(cè)IL-13Rα2和TGF-β蛋白表達(dá)水平。siRNA瞬時(shí)轉(zhuǎn)染沉默IL-13Rα2基因，qPC

3、R和Western blot檢測(cè)IL-13Rα2和TGF-β的mRNA及蛋白表達(dá)量，Western blot檢測(cè)collagen的蛋白表達(dá)量；轉(zhuǎn)染后再通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)熒光標(biāo)記法觀察和驗(yàn)證siRNA轉(zhuǎn)染前后IL-13Rα2和TGF-β的熒光蛋白表達(dá)量。
　　結(jié)果：
　　結(jié)果表明，肺成纖維細(xì)胞IL-13Rα2的表達(dá)隨著IL-13濃度的增加而增高，高濃度IL-13刺激（50、100 ng/ml）條件下IL-13Rα2表達(dá)水平顯著增

4、高（P<0.01）， TGF-β的表達(dá)量也增高（P<0.05），IL-13Rα1的表達(dá)則無(wú)明顯變化（P>0.05）；siRNA干擾沉默IL-13Rα2后，IL-13Rα2的表達(dá)量顯著下降（P<0.01），而此時(shí)TGF-β的表達(dá)量進(jìn)一步增高（P<0.05），膠原蛋白的表達(dá)也增高（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　綜合上述數(shù)據(jù)，外源性的IL-13刺激可增強(qiáng)肺成纖維細(xì)胞IL-13Rα2和TGF-β表達(dá),而對(duì)IL-13Rα1的表達(dá)量