小鼠小腦深部核與小腦皮層三叉神經(jīng)觸覺(jué)反應(yīng)區(qū)的解剖和功能關(guān)系.pdf

1、目的：
　　之前報(bào)道過(guò)吹風(fēng)刺激同側(cè)觸須墊能在小腦皮層CrusⅡ區(qū)分子層(Molecular layer，ML)和PC引起抑制性反應(yīng)。然而，這些對(duì)吹風(fēng)做出反應(yīng)的PC軸突末端在DCN上的投射位置以及它們之間的電生理學(xué)反應(yīng)關(guān)系還不清楚。因此，應(yīng)用電生理、神經(jīng)元順行追蹤技術(shù)和組織化學(xué)等方法研究了在體小鼠小腦皮層CrusⅡ區(qū)的三叉神經(jīng)觸覺(jué)反應(yīng)區(qū)與DCN之間的解剖和功能上的關(guān)系。
　　方法：
　　1.電生理記錄用電生理膜片鉗的場(chǎng)電

2、位和貼附式記錄方式記錄了小鼠小腦皮層CrusⅡ區(qū)分子層的場(chǎng)電位、DCN的場(chǎng)電位和DCN神經(jīng)元活動(dòng)。
　　2.神經(jīng)元的順行追蹤用生物素葡聚糖胺(biotinylated dextran amine，BDA)順行性追蹤的方法研究PC投射到DCN的位置
　　3.注射位置的確定小腦表面用亞甲基藍(lán)染色的方法確定活體小鼠注射BDA的位置。
　　4.組織化學(xué)小鼠注射BDA后飼養(yǎng)4-5天后麻醉，經(jīng)心灌流4％的多聚甲醛固定后取腦，再在福

3、爾馬林中固定3-4天后冠狀切片(切片厚度為200μm)，生物素染色后照相，觀察投射位置。
　　結(jié)果：
　　研究發(fā)現(xiàn)對(duì)觸覺(jué)產(chǎn)生抑制性反應(yīng)的浦肯野細(xì)胞的軸突投射到DCN間位核（interposed cerebellar nucleus，ICN）的前部(anterior part，IntA)、后部(posterior part，IntP)以及背外側(cè)峰(dorsolateral hump，IntDL)。在ICN中，場(chǎng)電位記錄情況下觸

4、覺(jué)刺激引起一個(gè)表現(xiàn)為兩個(gè)連續(xù)的負(fù)向波反應(yīng)即N1，N2，細(xì)胞外記錄所得到的結(jié)果與其相似，表現(xiàn)為出現(xiàn)兩個(gè)與之相對(duì)應(yīng)的峰電位頻率增加(N1，N2)。吹風(fēng)刺激能引起場(chǎng)電位反應(yīng)的最小吹風(fēng)持續(xù)時(shí)間為5ms;當(dāng)吹風(fēng)刺激的持續(xù)時(shí)間≥30 ms時(shí)，在ICN中觀察到刺激的關(guān)閉反應(yīng)(Roff)，但是面部吹風(fēng)刺激持續(xù)時(shí)間的增長(zhǎng)并沒(méi)有明顯的影響刺激開(kāi)始(Ron)(N1和N2)和關(guān)閉(Roff)反應(yīng)的幅度。此外，在ICN中N1的潛伏期和到達(dá)峰值的時(shí)間明顯比在ML中