不同分子量仿刺參Apostichopus japonicas糖胺聚糖抗凝血、抗血栓活性研究.pdf

1、本論文以仿刺參糖胺聚糖為研究對象，選擇了4種分別名為AHG、DAHG-1、DAHG-2和DAHG-3的仿刺參糖胺聚糖，對其分子量進行了測定，分別為98070、41149、24755和8871。并對其在不同給藥濃度情況下進行了體外、體內(nèi)抗凝血、抗血栓實驗，研究了仿刺參糖胺聚糖的抗凝血機制和抗凝血、抗血栓活性，為仿刺參糖胺聚糖進一步的藥用開發(fā)奠定了基礎。
　　通過體外實驗考察了不同分子量仿刺參糖胺聚糖抗凝血機制;研究了其對大鼠血漿AP

2、TT和PT的影響。結果表明在濃度為0.2mg/mL時，不同分子量仿刺參糖胺聚糖可以顯著延長APTT時間，而PT時間沒有顯著延長，說明仿刺參糖胺聚糖是通過影響內(nèi)源性凝血途徑來發(fā)揮抗凝血作用。
　　通過體內(nèi)水平考察了不同分子量仿刺參糖胺聚糖抗凝血、抗血栓活性;研究其對小鼠出血時間、凝血時間、體內(nèi)血栓形成的影響，對大鼠體外血栓、體內(nèi)血栓和血清內(nèi)t-PA含量的影響。
　　小鼠出血時間、凝血時間實驗結果表明，不同分子量仿刺參糖胺聚糖在

3、一定濃度下均能使小鼠凝血時間、出血時間延長。從凝血時間來看，AHG在給藥濃度1mg/kg及以上具有顯著凝血效果;而DAHG-1、2、3在給藥濃度10mg/kg及以上同樣具有顯著凝血效果。從止血時間來看，AHG在給藥濃度1mg/kg及以上同樣顯著延長出血時間;而DAHG-1、2在給藥濃度10mg/kg及以上同樣顯著延長出血時間;DAHG-3只有當給藥濃度為50mg/kg以上才會顯著延長出血時間。凝血時間、出血時間會隨分子量和濃度的增長而提

4、高。另外，陽性藥物達肝素CT/BT的值為0.28，不同分子量、不同給藥濃度的仿刺參糖胺聚糖CT/BT的值均大于達肝素，且仿刺參糖胺聚糖分子量越小，CT/BT的值越高，DAHG-3在腹腔注射濃度50mg/kg時CT/BT值達到最高，為0.66，安全性最高。
　　小鼠體內(nèi)血栓形成實驗結果表明，AHG在給藥濃度1mg/kg及以上能顯著提高血栓栓塞小鼠的恢復率，DAHG-3在給藥濃度50mg/kg以上可以顯著提高血栓栓塞小鼠的恢復率。與陽

5、性藥物達肝素對比，不同分子量仿刺參糖胺聚糖沒能產(chǎn)生顯著性差異。另外，仿刺參糖胺聚糖抑制體內(nèi)血栓形成的能力隨著分子量和濃度的提高而增強。
　　大鼠體外血栓形成實驗結果表明，AHG在給藥濃度0.1mg/kg及以上具有顯著的抑制血栓形成的能力，DAHG-1在給藥濃度1mg/kg及以上具有顯著的抑制血栓形成的能力，DAHG-2、3在給藥濃度10mg/kg及以上具有顯著的抑制血栓形成的能力。與陽性藥物達肝素相比，AHG在給藥濃度10mg/k

6、g及以上產(chǎn)生極顯著差異，DAHG-1、2在給藥濃度20mg/kg及以上產(chǎn)生極顯著差異。另外，仿刺參糖胺聚糖抑制血栓形成的能力隨著分子量和濃度的提高而增強。
　　大鼠頸部總動脈血栓形成實驗表明，AHG在給藥濃度0.1mg/kg及以上均可以極其顯著的延長大鼠頸部動脈血栓形成時間(OT)，DAHG-1、2、3在給藥濃度1mg/kg及以上均可以極顯著的延長OT值。與陽性藥物達肝素相比，AHG在給藥濃度0.1mg/kg及以上產(chǎn)生顯著差異，D

7、AHG-1、2、3分別在在給藥濃度1mg/kg、10mg/kg和20mg/kg及以上產(chǎn)生極顯著差異。另外，仿刺參糖胺聚糖抑制頸部總動脈血栓形成的能力隨分子量和給藥濃度增長而增強。
　　大鼠血清t-PA含量測定實驗結果表明，AHG在給藥濃度1mg/kg及以上顯著提高t-PA含量，DAHG-1、2在給藥濃度10mg/kg及以上顯著提高t-PA含量，DAHG-3不能提高t-PA含量。與陽性藥物達肝素相比，僅有AHG在給藥濃度達到20mg

8、/kg以上時才產(chǎn)生極顯著差異。由此說明，仿刺參糖胺聚糖在高濃度、高分子量時可以激活纖溶系統(tǒng)發(fā)揮溶栓作用，且激活能力會隨分子量和給藥濃度增長而增強。
　　綜上，體外抗凝血實驗表明，仿刺參糖胺聚糖是通過影響內(nèi)源性凝血途徑來發(fā)揮抗凝血作用。體內(nèi)抗凝血實驗表明，不同分子量仿刺參糖胺聚糖具有較強的抗凝血、抗血栓活性，且抗凝、抗栓活性會隨分子量和濃度的增長而增強，安全性隨分子量的降低而提高。大鼠血清t-PA含量測定實驗表明，仿刺參糖胺聚糖還可