SDF-1α在腦缺血亞急性期的作用及機(jī)制研究.pdf

1、腦缺血可導(dǎo)致神經(jīng)血管系統(tǒng)的不可逆損傷，但急性干預(yù)只在發(fā)病后4.5小時(shí)內(nèi)有效?；|(zhì)細(xì)胞衍生因子SDF-1（CXCL12）是一個(gè)趨化因子，在神經(jīng)血管系統(tǒng)發(fā)育時(shí)期起重要調(diào)節(jié)作用，主要通過(guò)促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞的遷移和調(diào)節(jié)神經(jīng)軸突的導(dǎo)向，同時(shí)能夠募集內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPC）參與血管新生。腦缺血后，內(nèi)源性的神經(jīng)血管系統(tǒng)修復(fù)不足以恢復(fù)動(dòng)物的神經(jīng)行為學(xué)功能，主要是由于內(nèi)源性的干/祖細(xì)胞不能有效的遷移到缺血周?chē)鷧^(qū)分化成為成熟的細(xì)胞參與神經(jīng)血管系統(tǒng)的修復(fù)。本論文主要

2、研究SDF-1基因治療和SDF-1基因修飾的EPC細(xì)胞移植治療在腦缺血亞急性期的作用及機(jī)制。
　　在小鼠大腦中動(dòng)脈阻塞一周后的腦缺血周?chē)鷧^(qū)，立體定位注射腺相關(guān)病毒（AAV）介導(dǎo)的SDF-1基因治療腦缺血小鼠，研究SDF-1在腦缺血亞急性期神經(jīng)和血管修復(fù)中的作用，及SDF-1介導(dǎo)的神經(jīng)血管修復(fù)機(jī)制。結(jié)果表明AAV-SDF-1基因治療能夠顯著改善動(dòng)物的神經(jīng)行為學(xué)功能，減小腦萎縮體積，促進(jìn)神經(jīng)再生和血管新生。AMD3100阻斷SDF-1

3、/CXCR4信號(hào)通路，即消除了AAV-SDF-1的基因治療效果。SDF-1/CXCR4激活了下游的AKT，ERK，p38信號(hào)通路，但不激活JNK信號(hào)通路。同時(shí)發(fā)現(xiàn)腦缺血亞急性期SDF-1基因治療能夠促進(jìn)少突膠質(zhì)祖細(xì)胞（OPC）的增殖和向缺血周?chē)鷧^(qū)的遷移，同時(shí)能夠保護(hù)軸突髓鞘的完整性。
　　利用慢病毒（LV）介導(dǎo)的SDF-1和GFP（對(duì)照）病毒，感染人臍帶血來(lái)源的EPC，得到EPC-SDF-1和EPC-GFP細(xì)胞。立體定位注射EPC

4、-SDF-1，EPC-GFP，LV-SDF-1及PBS至大腦中動(dòng)脈阻塞一周后的小鼠腦缺血周?chē)鷧^(qū)，進(jìn)而研究EPC-SDF-1細(xì)胞移植對(duì)腦缺血?jiǎng)游锏淖饔?。結(jié)果表明，EPC-SDF-1細(xì)胞移植能夠明顯改善動(dòng)物的神經(jīng)行為學(xué)功能，減小動(dòng)物的腦萎縮體積，保護(hù)血管，促進(jìn)血管新生和神經(jīng)再生，效果優(yōu)于單純SDF-1基因和EPC-GFP細(xì)胞治療。體外研究表明，EPC-SDF-1細(xì)胞能夠增加VEGF蛋白的表達(dá)，具有更高的成血管能力和細(xì)胞活性。
　　終上