兩型骨骼肌纖維在體外培養(yǎng)過程中的相互轉換.pdf

1、目的：通過在不同糖濃度條件下體外培養(yǎng)快肌纖維和慢肌纖維，觀察其 MHC同功型表達情況，以探討快、慢肌纖維相互轉化的現(xiàn)象及其特征。
　　方法：1取兔副半膜肌背側亞部，（快肌，Ⅱ型肌纖維）和固有半膜肌亞部（慢肌，Ⅰ型肌纖維）通過ATP酶染色法，進行肌纖維類型鑒定。2取兔副半膜肌背側亞部，和固有半膜肌亞部獲取組織和細胞，按以下分組進行實驗。（1）組織組分別獲取兩個亞部的肌組織備用。（2）消化組分別從兩個亞部獲取兩型肌細胞備用。（3）高糖

2、培養(yǎng)組是將兩型肌細胞用高糖培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。（4）低糖培養(yǎng)組是將兩型肌細胞用低糖培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。所有培養(yǎng)的兩型肌細胞分別在1、3、7天取材，并與組織組和消化細胞組一起檢測MHC同功型的表達情況。
　　結果：1）ATP酶染色顯示家兔副半膜肌背側亞部著色較深，固有半膜肌亞部著色較淺。未見深淺著色相間排列的現(xiàn)象。
　　2）組織組MHC同功型檢測結果顯示Ⅰ型肌纖維表達MHCⅠ,Ⅱ型肌纖維表達MHCⅡa,Ⅱb及Ⅱx。
　　3）消化

3、組MHC同功型檢測結果顯示Ⅰ型肌纖維表達MHCⅠ,Ⅱ型肌纖維表達MHCⅡa,Ⅱb及Ⅱx。
　　4）Ⅰ型細胞和Ⅱ型細胞高糖培養(yǎng)組：Ⅰ型細胞在高糖培養(yǎng)時第1天以表達MHCⅠ為主，同時也表達少量的MHCⅡa, MHCⅡb, MHCⅡx。第3天時仍表達MHCⅠ，但其表達量較第1天減少，具有顯著性差異，MHCⅡa, MHCⅡb, MHCⅡx表達量與第1天比較明顯增加，有顯著性差異。第7天時MHCⅠ表達量與第3天比較進一步減少，具有顯著性差異

4、，MHCⅡa, MHCⅡb, MHCⅡx表達量與第3天比較無明顯變化。
　?、蛐图毎诟咛桥囵B(yǎng)時第1天只表達 MHCⅡa, MHCⅡb, MHCⅡx，不表達MHCⅠ；第3天和第7天仍只表達MHCⅡa, MHCⅡb, MHCⅡx，不表達MHCⅠ與第1天比較無明顯差異。
　　5）Ⅰ型細胞和Ⅱ型細胞低糖培養(yǎng)組：Ⅰ型細胞在低糖培養(yǎng)時第1天以表達MHCⅠ為主，同時也表達少量的MHCⅡa, MHCⅡb, MHCⅡx。第3天時仍表達MHC

5、Ⅰ，其表達量與第1天無顯著性差異，同時MHCⅡa, MHCⅡb, MHCⅡx表達量增加，與第1天比較有顯著性差異。第7天時MHCⅠ表達量與第3天同樣無顯著性差異，MHCⅡa, MHCⅡb, MHCⅡx表達量與第3天比較無顯著性差異，但與第1天比較仍存在著顯著性差異。
　?、蛐图毎诘吞桥囵B(yǎng)時第1天只表達 MHCⅡa, MHCⅡb, MHCⅡx，不表達MHCⅠ。第3天仍表達MHCⅡa, MHCⅡb, MHCⅡx，其中Ⅱa和Ⅱb表達量

6、增加，Ⅱx的表達量減少，Ⅱb和Ⅱx的表達量與第1天比較有顯著性差異，同時開始表達少量的MHCⅠ。第7天MHCⅡa, MHCⅡb, MHCⅡx的表達變化與第3天類似但無顯著性差異，MHCⅠ的表達量與第3天比較有所增加且與第3天存在有顯著性差異。結論：兩型骨骼肌纖維在體外分離過程中沒有相互轉化的現(xiàn)象，但在體外培養(yǎng)過程中無論是在高糖培養(yǎng)還是低糖培養(yǎng)條件下，Ⅰ型細胞都會在第1天開始向Ⅱ型細胞轉化，此后MHCⅡa, MHCⅡb, MHCⅡx的表達