多價大腸桿菌噬菌體裂解性能分析及基因組注釋.pdf

1、多價噬菌體具有廣泛的宿主譜，在細菌病的治療方面有著廣闊的應用前景。本研究以一株禽源致病性大腸桿菌的多價噬菌體Bp7為主要研究對象，進行了噬菌體形態(tài)、裂解譜、生活周期、基因組學及其與其它噬菌體的抗原差異性分析的一系列研究。
　　 以40株大腸桿菌為宿主菌，采用雙層瓊脂平板法測定噬菌體Bp7的效價及裂解譜，并應用透射電鏡觀察分析其病毒粒子形態(tài)以及其侵染并裂解大腸桿菌的過程。結果顯示:Bp7寬噬率為35％。病毒粒子的頭部外廓呈六邊形，

2、平均直徑約73nm，尾長約106nm，有尾鞘;噬菌體Bp7侵染大腸桿菌后30min時處于隱蔽期，45min時處于成熟階段，60min時已經(jīng)進入釋放期，一個溶菌周期大約為60min。
　　 選擇6株不同裂解譜的大腸桿菌噬菌體，進行抗體與噬菌體的交叉抑制試驗，并經(jīng)SDS-PAGE電泳分析噬菌體間的抗原差異。結果:原裂解譜相同的噬菌體，主蛋白區(qū)域分布相同;原裂解譜部分相同的噬菌體，蛋白條帶分布情況相似。具有相同或部分相同裂解譜的噬菌體

3、，在吸附同一株大腸桿菌時所結合的位點并不一定相同;在這6株噬菌體的表面存在著部分相同的表面抗原，同時存在著各自特異的表面抗原。
　　 采用鳥槍法對噬菌體Bp7基因組進行序列測定，并進行注釋。結果:噬菌體Bp7與腸桿菌科噬菌體JS98和JS10同源性達90％以上;已發(fā)現(xiàn)243個ORFs，預測到68個可能基因，包括頭部、頸部、衣領、尾鞘、尾管、基底板、尾絲基因、DNA聚合酶、翻譯抑制蛋白、DNA結合蛋白、重組蛋白、引發(fā)酶/解旋酶、末