Shewanella oneidensis中溶菌糖基轉(zhuǎn)移酶對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗性的影響.pdf

1、Shewanella oneidensis在分類學(xué)上屬于γ-變形菌綱，作為一種兼性厭氧型細(xì)菌，S.oneidensis以其呼吸底物的多樣性而聞名，此外，該菌還具有對(duì)多種β-內(nèi)酰胺類抗生素的天然抗性。實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)β-內(nèi)酰胺酶BlaA的誘導(dǎo)表達(dá)是其具有抗性的原因。對(duì)Escherichia coli的研究發(fā)現(xiàn)，溶菌糖基轉(zhuǎn)移酶(lytictransglycosylase，LT)能催化產(chǎn)生可誘導(dǎo)β-內(nèi)酰胺酶表達(dá)的小分子，它們的缺失使細(xì)菌抗性

2、減弱。為了探究S.oneidensis中LTs在β-內(nèi)酰胺酶表達(dá)過(guò)程中的作用，本文對(duì)相關(guān)分子機(jī)制進(jìn)行了研究。
　　S.oneidensis中存在七個(gè)LTs，分別為SltY、MltB1、MltB2、MltC、MltD1、MltD2和MltF。單一酶的缺失不會(huì)改變細(xì)胞形態(tài)，但MItF、MltB2或SltY的缺失會(huì)使突變株生長(zhǎng)變慢。
　　與E.coli不同，S.oneidensis中SltY、MltB1或者M(jìn)ltB2的缺失能增加對(duì)

3、β-內(nèi)酰胺類抗生素的抗性，這種抗性的增強(qiáng)與blaA有關(guān)。進(jìn)一步研究顯示這種抗性在雙突菌株ΔmltBlΔmltB2和ΔmltB2ΔsltY中具有疊加效應(yīng)。
　　結(jié)合野生型菌株中LTs的表達(dá)情況，我們認(rèn)為S.oneidensis中LTs的具體分工可能有所不同，導(dǎo)致它們?cè)诰S持細(xì)胞正常的生長(zhǎng)與blaA的誘導(dǎo)表達(dá)過(guò)程中作用不同。MltF和MltB1分別在細(xì)胞生長(zhǎng)和blaA表達(dá)中發(fā)揮作用而MltB2和SltY則同時(shí)在上述過(guò)程發(fā)揮作用。

4、　　前期研究發(fā)現(xiàn)ΔmrcA和ΔampG都具有很強(qiáng)的β-內(nèi)酰胺類抗生素抗性，但BlaA在ΔampG中是誘導(dǎo)酶，而在ΔmrcA中是組成酶。因此我們對(duì)LTs缺失突變株中blaA的表達(dá)與MrcA或AmpG介導(dǎo)的blaA表達(dá)通路的關(guān)系開展了研究。發(fā)現(xiàn)blaA的表達(dá)在ΔmltB2Δslt YΔmrcA中能夠被氨芐青霉素誘導(dǎo)，而在ΔmltB1ΔmltB2ΔmrcA中不能被誘導(dǎo)，而且Δslt YΔmrcA與ΔmrcA的BlaA活性相似，都不受到氨芐青霉