穿山龍多糖調控PPARγ-NADPH氧化酶-ROS-NF-κB信號通路抗動脈粥樣硬化分子機制研究.pdf

1、目的：研究穿山龍多糖調控PPARγ-NADPH氧化酶/ROS-NF-κB信號通路抗動脈粥樣硬化分子機制。
　　方法：（1）體外化學實驗使用試劑盒產(chǎn)生羥自由基及超氧陰離子，小鼠肝勻漿脂質過氧化法及紅細胞膜破裂法產(chǎn)生自由基，檢測不同濃度穿山龍多糖的抗氧化作用；（2）細胞培養(yǎng)實驗實驗分為六組：正常組，H2O2模型組，穿山龍多糖高、中、低劑量組，維生素C組。給藥組給予藥物12 h后，除正常組外，各組均用500μmol/L H2O2作用HU

2、VECs4 h造成損傷，實驗結束后，MTT法測定細胞活力；試劑盒檢測 LDH、MDA、SOD、T-AOC、GSH-Px水平以評價細胞損傷及穿山龍多糖抗氧化活性；2’,7’-二氯熒光乙酰乙酸鹽（DCFH-DA）檢測細胞內活性氧（ROS）的含量；Western Bolt法檢測細胞內Nox4、p22phox、NF-κB（p65)、IκB及PPARγ、ICAM-1和VCAM-1的蛋白表達水平；實時定量逆轉錄聚合酶聯(lián)反應（qRT-PCR）法檢測N

3、ox4、p22phox、ICAM-1、VCAM-1、PPARγ的mRNA表達水平。
　　結果：在體外化學實驗中，穿山龍多糖可以抑制超氧陰離子自由基、羥基自由基和脂質過氧化的產(chǎn)生。在H2O2誘導的HUVECs氧化損傷模型中，穿山龍多糖可抑制細胞中LDH、MDA、ROS水平，并增強細胞內SOD、T-AOC和GSH-Px活力；此外，穿山龍多糖可在蛋白水平及mRNA水平下調 Nox4、p22phox、、ICAM-1和VCAM-1的表達，降