晚期糖基化終末產物受體通過穩(wěn)定β-catenin信號參與調控TDI哮喘氣道炎癥.pdf

1、目的：
　　甲苯二異氰酸酯(TDI)是哮喘重要的致病因素之一。其所致的哮喘主要病理特征為氣道中性粒和嗜酸性粒細胞浸潤及氣道重塑，然具體發(fā)病機制不明。研究表明，晚期糖基化終末產物受體(RAGE)及β-catenin信號在哮喘發(fā)病中扮演重要角色，但其在TDI哮喘中的作用尚未闡明。本研究意在探討RAGE和β-catenin在TDI哮喘中的作用及其中機制。
　　內容與方法：
　　一、建立TDI哮喘模型
　　第1、8天用0

2、.3％TDI經小鼠耳背皮膚致敏，第15、18、21天霧化吸入激發(fā)，按激發(fā)所用TDI濃度及次數(shù)分組:①1％TDI1組:第15天用1％TDI激發(fā)1次;②1％TDI2組:第15、18天用1％TDI激發(fā)2次;③1％TDI3組:第15、18、21天用1％TDI激發(fā)3次;④3％TDI1組:第15天用3％TDI激發(fā)1次;⑤3％TDI2組:第15、18天用3％TDI激發(fā)2次;⑥3％TDI3組:第15、18、21天用3％TDI激發(fā)3次。檢測各組小鼠的氣道

3、反應性、氣道周圍炎癥細胞、血清IgE、Th1/Th2炎癥指標。
　　二、在TDI哮喘模型上干預RAGE
　　按“一”中的方法建立TDI哮喘小鼠模型，激發(fā)前經腹腔給RAGE拮抗劑[FPS-ZM1及RAGE antagonist peptide(RAP)]，觀察各項哮喘指標的變化，同時檢測肺組織內β-catenin的表達和分布情況。
　　三、體內干預β-catenin信號
　　構建TDI哮喘小鼠模型，自第1次激發(fā)開始

4、連續(xù)7天每天給小鼠腹腔注射β-catenin信號阻斷劑（XAV-939及ICG-001），觀察各項哮喘指標的變化。
　　結果：
　　一、皮膚致敏后經霧化吸入3％TDI激發(fā)3次可建立TDI哮喘模型
　　與對照相比，1％TDI1、1％TDI2及3％TDI1組的氣道反應性無明顯增高，氣道周圍幾無炎癥浸潤，淋巴上清IL-4、IFN-γ及血清IgE水平亦不高;1％TDI3及3％TDI2組的氣道周圍可見少許炎癥細胞，BALF中性粒

5、細胞數(shù)目稍增多，但氣道高反應性、IL-4及IFN-γ水平都不高;3％TDI3組的氣道反應性增高，支氣管周圍炎癥細胞浸潤明顯，BALF中炎癥細胞顯著增多，IL-4、IFN-γ及IgE均升高。
　　二、阻斷RAGE可減輕TDI哮喘小鼠氣道炎癥并抑制TDI誘導的β-catenin活化
　　拮抗RAGE可下調TDI哮喘小鼠RAGE及其配體的表達，減輕TDI誘導的氣道高反應性及氣道周圍炎癥浸潤，減少BALF中炎癥細胞數(shù)目，并抑制Th2

6、炎癥。同時我們發(fā)現(xiàn)，β-catenin在TDI哮喘小鼠肺組織細胞膜上的表達減少，在胞漿及胞核的表達增多;與此一致的是，磷酸化Akt(Ser473)、磷酸化GSK3β(Ser9)及活化的β-catenin水平均升高，而使用RAGE抑制劑可以部分逆轉上述這些表現(xiàn)，同時下調TDI誘導的β-catenin靶基因表達。
　　三、阻斷β-catenin信號可減輕TDI哮喘小鼠氣道炎癥
　　β-catenin抑制劑明顯減輕了TDI哮喘小鼠