大腸桿菌的細胞間通訊及信號傳遞.pdf

1、在細菌的生活過程中，環(huán)境條件、細菌的密度及生理狀態(tài)常常處于變化之中。經(jīng)過長期的進化過程，為了對外部環(huán)境及胞內(nèi)生理狀態(tài)的變化作出及時反應，細菌已經(jīng)學會利用各種小分子化合物作為信號分子，并發(fā)展出各種信號傳遞機制去捕獲及把這些信號傳遞到細胞中去。細菌細胞間通迅能使細菌在多細胞水平上采取協(xié)調(diào)一致的行動，這一過程通常又稱為群體感應或密度依賴的基因調(diào)控，即細菌在增殖的過程中，不斷地向胞外分泌信號小分子，這種信號小分子被稱為自誘導物。隨著細菌數(shù)量的增

2、加，自誘導物就在周圍環(huán)境中逐漸積累，當自誘導物達到一定的閾值濃度時，即可進入細胞，與受體結(jié)合，從而開啟或關閉一些基因的轉(zhuǎn)錄。在大腸桿菌K-12菌株中，存在兩套群體感應信號系統(tǒng)，以AI-1為信號分子的群體感應系統(tǒng)一及以AI-2為信號分子的群體感應系統(tǒng)二。 群體感應系統(tǒng)一包括與LuxR及LuxI同源的一對蛋白。群體感應系統(tǒng)一的信號分子為AI-1，它由LuxI合成，它的受體蛋白為LuxR。大腸桿菌中的LuxR同源蛋白為SdiA，但無L

3、uxI同源蛋白且不能合成任何AI-1信號分子。但是大腸桿菌的SdiA蛋白能夠感應來自其它細菌的AI-1信號分子。最近有報道指出，大腸桿菌通過利用SdiA感應環(huán)境中的吲哚及AI-1的濃度變化來控制生物膜的形成，至于SdiA能否直接與吲哚結(jié)合，目前仍沒有確切的答案。研究表明，SdiA能夠促進或抑制核糖核酸多聚酶與啟動子的結(jié)合，從而控制目的基因的轉(zhuǎn)錄。細胞中過量表達SdiA能夠影響許多基因的表達，其中包括一些與細胞分裂、運動性、趨化性、及藥物

4、代謝相關的基因。 大腸桿菌有一個完整的群體感應系統(tǒng)二，共包括九個基因，即luxS、lsrR、lsrK、及l(fā)srACDBFG。cAMP-CRP復合體促進lsrR及l(fā)sr操縱子(lsrACDBFG)的表達，lsrR與lsr操縱子相鄰但轉(zhuǎn)錄方向相反，LsrR能夠抑制lsrR及l(fā)sr操縱子的表達。由LuxS合成群體感應系統(tǒng)二的信號分子，即AI-2，隨著細菌的增殖，該信號分子在胞外不斷地積累。當胞外的AI-2達到一定的閾值濃度時，由lsr

5、操縱子編碼的載體運入胞內(nèi)，然后被LsrK磷酸化，磷酸化的AI-2與LsrR結(jié)合并改變其構(gòu)象，從而達到調(diào)控目的。LsrF與LsrG參與后續(xù)的磷酸化AI-2的降解過程。最近研究表明，lsrR或lsrK突變株形成生物膜的厚度及總量均較野生株有所降低。同時，lsrR或lsrK突變株中的sRNA，即全局調(diào)控因子DsrA及細胞分裂抑制因子DicF的表達增加了2-4.4倍。在弧菌Vibrio harveyi中，有三條群體感應信號通路，這三條通路會聚到

6、一起，控制同一套基因的表達，sRNA也參與了這一調(diào)控過程。在大腸桿菌中，僅知道cAMP-CRP復合體通過結(jié)合到lsrR及l(fā)sr操縱子的啟動序列上，促進它們的表達，LsrR的作用正好相反。然而，大腸桿菌中群體感應系統(tǒng)一與系統(tǒng)二之間的相互作用關系仍不清楚。 為了更全面地了解大腸桿菌群體感應信號途徑，及群體感應與其它信號通路之間的關系，本研究采用基因敲除、凝膠阻滯及酶學分析等方法，分析了SdiA對YdiV的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用，及SdiA與群

7、體感應系統(tǒng)二的相互作用。環(huán)二烏苷酸是細菌中的第二信使，它由含GGDEF。結(jié)構(gòu)域的蛋白合成，被含EAL結(jié)構(gòu)域的蛋白降解。YdiV就是一個含EAL結(jié)構(gòu)域的蛋白。在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)sdiA及ydiV的表達同時受到葡萄糖的抑制。SdiA能夠結(jié)合到y(tǒng)diV的啟動子區(qū)域，來自于其它細菌的AI-1在非sdiA突變株中能夠促進vdiV的表達。通過進一步的研究，我們還發(fā)現(xiàn)SdiA具有非特異性地結(jié)合DNA的能力。在sdiA及ydiV雙突變株中，而不是單突