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文檔簡介
1、湖南農業(yè)大學碩士學位論文三葉斑潛蠅實時熒光PCR檢測及地理種源關系研究姓名:馮賢申請學位級別:碩士專業(yè):農業(yè)昆蟲與害蟲防治指導教師:馬駿陳乃中20070601AbstractLiriomyzatrifolii(Burgess)(Diptera:Agromyzidae)isallimportantpestofvegetableandcut—flowercropsaroundtheworldLiriomyzatrifoliiinChinam
2、ainlandwasfirstreportedfromZhongshanofGua/tgdongprovincein2006WereportherethatthispesthasrecentlyexpandeditsdistributioninChina,alongwithahostplantrangeextensionandpopulationexplosionThemolecularidentifyingLiriomyzatrifo
3、lii(Burgess)basedonreal—timePCRwasestablishedin[hispaperUsingpartialDNAsequencesofmitochondrialCOIofLtrifoliioccurredinGuangdongandTaiwanprovincesinChinaJapan,Philippines,Israel,GermanyUS氣MexicoandHonduras,andrelatedspec
4、iesfromGenbank,the三trifolii—specificprobedistinguishingfromLsativaeBlanchardisdesignedItobtainedthesanleresultsinindividualsofdifferentstagesItisasentitive,fastandlesscostlyassaysystemcomparedtoothermolecularmethod,sucha
5、srandomamplifiedpolymorphicDNA—PCR,PCRrestrictionfragmentlengthpolymorphism,DNAsequencingandmultiplexpolymerasechainreactionThepartialCOlsequenceofmtDNAfrom14leafminerspopulationswereanalyzedTheprobesandprimersforL吮白liiw
6、eredesignedbasisonthealignsequenceoftheamplifiedCOImtDNAofLiriomyzasppbyusingtheCLUSTSAL181ofthesequencesoftwareTheprobewaslabeledtwofluorescentdyes,thatisareporterof6carboxyfluorescein0:AM)atthe5’endandaquencherof6carbo
7、xytetramethhylrhodamine(TAMRA)atthe3’endThereal—timePCRmethoddevelopedinidentitifyingLtrifoliiinthisstudywasin4hrs,Itisastableandpreciseidenti助ngmethodTheresultsshowedthatthemitochondrialcytochromeoxidaseIgenesequencedfr
8、om14populationscollectedfromZhuhai,Ningbo,Taiwan,ZhongshaninChinaandJapan,Israel,GermanyandUSAwereidenticalNogeneticvariationwasobservedbetweenpopulationeitherfromdifferentgeographicallocalitiesorfromdifferenthostplantsT
9、hephylogeneticanalysisindicatedthatChinapopulationwasgroupedintothetrifolii—Wclade,belongingtoanonpepperlineage,whichalsoincludesotherrecentlyintroducedAsianpopulationsKeywords:Liriomyzatrifolii,mtDNACOlgene,molecularide
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