枇杷幼果在低溫脅迫下基因的差異表達(dá).pdf_第1頁
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1、福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文枇杷幼果在低溫脅迫下基因的差異表達(dá)姓名：吳海波申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：果樹學(xué)指導(dǎo)教師：鄭國華20100401fl繾農(nóng)林大學(xué)碩：E學(xué)位論文枇杷幼果在低溫脅迫下基因的差異表達(dá)AbstractInordertoanalyzethemolecularmechanismofcoldtoleranceinloquatwithearly—maturingandsusceptibleto—frostdamageZaoZhongN

2、o6Ioquatfruitastheresearchobject，DDRTPCRtechniquewasusedtOstudythegeneexpressionduringthecourseofcoldstressinloquatTheSDSmethodwasimprovedtofindoutakindoffastandefficientextractionmethodoftotalRNAinloquatfruit，andtheRNAe

3、xtractedusingthismethodwassuitableforDDRTPCRanalysisByoptimizingthetest，thebestDDRTPCRanalysissystemforloquatfruitduringthecourseofcoldstresswasestablished，In20Itlsystem，eachcomponentwasidentifiedas：TemplatecDNA1Obtl，Pri

4、mer05州，dNTPs50rt0，10x3C5EulliLf2p1，Taqenzyme1U，annealingtemperature40。COnthebasisofthissystem，themRNAchangesofloquatfruitwasanalyzedundertheconditionof0“Ctreatedfor6hNineteendifferentiallyexpressedgenesegmentsinducedbyco

5、ldstresswereobtainedandfourofthemwasconfirmedaspositiveclonesbyReverseNorthemdotblotting(ItwasnamedCSIGE1～4__C艘6tms’nQ岬GHlHin(0RE醛UD№即iml～4)ThefourpositivefragmentsweresequencedandhavebeensubmittedtoGenBankCSIGE!4followe

6、dbytheaccessionnumberofGT617703，GT617704，GT617705，GT617706Theresultofsequencesimilarityanalysisshowedthat：(!)CSIGE1sequencehashighlyhomologoustOHomosapienschromosome8cloneRpl1420F14mapp21pl1，whichWasacoldresistancegeneTh

7、isshowsthatplantandanimalgenomeshavecertaincommoncodingsequence，maybetheyhavesomecommongeneexpressionmechanism；：(g)CSIGE2hasdifferentdegreesofhomologywithsomegenes，suchasalcoholdehydrogenase(ADH)inricinuscommunis，NADPdep

8、endentoxidoreductasesinarabidopsisthalianasalicylicacidstress—relatedgenesinsoybean，CSIGE3hassomehomologoustoESTsstressedbyadversityinvitisviniferaandcucumbentheregulationoftheirexpressionplaysomerolesinresponsetocoldstr

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