通過(guò)轉(zhuǎn)錄組和蛋白組研究鎘對(duì)小鼠的生物毒性.pdf

1、鎘是一種人體非必需的重金屬元素，鎘的吸入會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生許多不利影響，包括細(xì)胞癌變和凋亡等?，F(xiàn)有的研究對(duì)鎘的吸收，鎘引起細(xì)胞毒性等領(lǐng)域的生化、分子機(jī)制做了大量工作，但對(duì)于鎘在體內(nèi)代謝的具體分子機(jī)制闡釋還不夠全面，因此，本研究運(yùn)用蛋白組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)手段，以小鼠為動(dòng)物模型，更加全面系統(tǒng)的研究了鎘的毒性機(jī)理。結(jié)果如下:
　　 1.添食小鼠不同鎘濃度的飼料(0ppm，10ppm，102ppm，103ppm和104ppm)7天，ICP-AES

2、測(cè)量小鼠肝臟，腎臟組織鎘、鐵和鋅等金屬離子含量，發(fā)現(xiàn)組織鎘含量隨著添食中鎘的濃度增加而增加，鐵離子含量趨勢(shì)相反。
　　 2.將小鼠腎臟總蛋白提取出來(lái)后，用二維電泳技術(shù)分析添食鎘后（103ppm組）的小鼠腎臟蛋白表達(dá)譜變化。MALDI-TOF/TOF質(zhì)譜鑒定得到34個(gè)表達(dá)差異蛋白，其中15個(gè)上調(diào)蛋白，19個(gè)下調(diào)蛋白。KEGG pathway分析表明:表達(dá)水平升高的蛋白，主要參與Immune system和Cell communic

3、ation通路;表達(dá)下調(diào)的蛋白主要參與Energy metabolism和Microbial metabolism通路。
　　 3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析相關(guān)差異蛋白基因結(jié)果表明，部分蛋白水平和mRNA水平表達(dá)并不完全一致。如蛋白PHB，但是westernblot實(shí)驗(yàn)表明PHB蛋白在鎘不同添食濃度的四組小鼠腎臟中，顯示出表達(dá)量的鎘濃度依賴(lài)性變化。
　　 4.分別用0μ mol/kg，5μ mol/kg和10μ mol/k

4、g體重的CdCl2劑量皮下注射小鼠，24小時(shí)后取小鼠的脾臟組織，送交上海晶能生物公司采用Illumina小鼠表達(dá)譜芯片分析小鼠脾臟表達(dá)譜的變化情況。共發(fā)現(xiàn)317個(gè)基因發(fā)生變化。GO分析上調(diào)基因主要富集在抗氧化生物過(guò)程，而下調(diào)基因主要富集在免疫相關(guān)的生物過(guò)程;KEGG pathway分析表明表達(dá)上調(diào)的基因主要參與了能量、毒物代謝和破骨細(xì)胞分化信號(hào)途徑，下調(diào)的基因主要涉及膜蛋白的運(yùn)輸和吞噬途徑。
　　 5.比較鎘誘導(dǎo)脾臟差異基因和和