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1、目的:制備中藥復(fù)方T最佳提取物,為中藥復(fù)方T在防治寄生蟲(chóng)病運(yùn)用提供依據(jù)。
方法:①以感染寄生蟲(chóng)Z的動(dòng)物L(fēng)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,建立藥效學(xué)評(píng)價(jià)方法,對(duì)8個(gè)中藥復(fù)方進(jìn)行殺蟲(chóng)試驗(yàn)篩選。②選擇不同溶媒提取中藥復(fù)方T并進(jìn)行安全性試驗(yàn)。③建立復(fù)方T的紫外分析方法,對(duì)提取方法、粉碎度、溶媒用量、提取時(shí)間和提取次數(shù)等單因素進(jìn)行考察,優(yōu)選出各單因素水平,采用L9(34)正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)選出復(fù)方T的最佳提取工藝。④制備1g/ml的中藥復(fù)方T最佳提取物。⑤以乙
2、酸乙酯-丙酮-氨水(10:3:1)為展開(kāi)劑,碘化鉍鉀試液為顯色劑,采用薄層色譜法對(duì)中藥復(fù)方T最佳提取物進(jìn)行定性鑒別。⑥選用流動(dòng)相:甲醇-0.01moL/L硫酸銨溶液(40:60),用磷酸調(diào)pH值至4.0;檢測(cè)波長(zhǎng)247nm,采用高效液相法測(cè)定復(fù)方T最佳提取物中指標(biāo)成分H的含量。⑦對(duì)1g/ml的中藥復(fù)方T最佳提取物進(jìn)行藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)。
結(jié)果:篩選出中藥復(fù)方T粗提物在20g/ml,4h對(duì)動(dòng)物L(fēng)的寄生蟲(chóng)Z殺滅率達(dá)100%,動(dòng)物L(fēng)也出
3、現(xiàn)23.33%的死亡率;選取提取溶媒Ⅱ時(shí),中藥復(fù)方T的毒性降低,4h殺蟲(chóng)率為100%,48h動(dòng)物L(fēng)的死亡率為0;復(fù)方T提取物的紫外最大吸收波長(zhǎng)是240nm,方法學(xué)考察的各項(xiàng)RSD值均小于2%;復(fù)方T最佳提取物制備工藝為:粉碎過(guò)80目篩網(wǎng),選用溶媒Ⅱ,回流法提取3次,每次60min,溶媒用量每次為10倍;中藥復(fù)方T提取物建立的薄層色譜條件乙酸乙酯-丙酮-氨水(10:3:1)可行,對(duì)照品和對(duì)照品藥材、供試品溶液的指示斑點(diǎn)一致,Rf值為0.6
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