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文檔簡介
1、在卵巢卵泡發(fā)育和成熟過程以及多種內分泌功能維持過程,甲狀腺激素(THs)起著重要的作用。甲狀腺功能低下不僅會影響卵巢卵泡的發(fā)育及功能,引起發(fā)情周期紊亂、排卵障礙等青春期疾病,還會改變一氧化氮合酶(NOS)的活性。有關甲狀腺激素受體α1(TRα1)和NOS亞型在卵巢中的表達情況及其影響仍不清楚,因此本實驗研究目的如下:
1.闡明甲狀腺激素(THs)對新生未成熟大鼠卵泡發(fā)育的影響。
將30只哺乳期的雌性大鼠隨機分為3組:
2、對照組、甲狀腺功能亢進(甲亢)組、甲狀腺功能低下(甲減)組。在產(chǎn)后第10天和第21天分別測定體重、血清激素、卵巢組織變化、NOS的活性以及TRα1和NOS亞型的表達定位情況。結果顯示:甲亢和甲低組的體重明顯降低,且與對照組相比差異均顯著(P<0.05);甲亢組血清中T3、T4、E2的濃度增加,甲低減組血清中T3、T4、E2的濃度下降;甲亢組和甲減組卵巢內的原始卵泡、初級卵泡、次級卵泡、有腔卵泡的數(shù)量與對照組的相比都顯著減少(P<0.05
3、)。免疫組化結果顯示:TRα1和NOS亞型在卵巢表皮細胞、生長卵泡、有腔卵泡中都表達,但在顆粒細胞和卵泡的膜細胞上表達更強;甲亢組中NOS的活性顯著增強,甲減組的NOS活性消失??傊覀兊慕Y果表明TH在卵巢功能和NOS活性的調控方面起著重要作用,TH和NO信號通路在新生未成熟大鼠的卵巢卵泡發(fā)育的過程中可能還存在聯(lián)系。
2.驗證NOS和TRα1在甲狀腺功能紊亂情況下的作用。
發(fā)現(xiàn)在新生未成熟的甲亢和甲減組大鼠的卵母細
4、胞、顆粒細胞、卵泡膜細胞中都存在神經(jīng)元NOS(nNOS)和TRα1。甲亢組卵巢內NO的含量和cNOS(constitutiveNOS)的活性與甲減組、對照組相比都顯著下降。此外,甲亢組有腔卵泡的數(shù)量和甲減組無腔卵泡的數(shù)量都顯著減少。數(shù)據(jù)還表明:33日齡時,甲亢組血清中T3和T4的總濃度增加,而甲減組T3和T4的總濃度降低;甲亢組和甲減組血清中雌二醇(E2)相對實驗組而言都有所減少,并且甲亢組血清中雌二醇(E2)要明顯高于甲減組。因此得出
5、結論,甲狀腺激素是卵泡發(fā)育必需的,并且它和NO信號通路在未成熟大鼠的卵巢卵泡發(fā)育過程存在聯(lián)系。在甲狀腺功能亢進癥中,甲狀腺激素和TRα1會引起雌激素不足,從而負調控nNOS的功能,抑制NO合成和卵泡形成;當甲狀腺功能減退時,初級卵泡發(fā)育受抑制,有腔卵泡發(fā)育得到改善。
3.驗證THs是否是卵巢卵泡發(fā)育和各種內分泌調控所必需的,因此實驗旨在闡明TH對青春期、發(fā)情周期的影響以及TRα1在未成年大鼠卵巢內的表達情況。
用T4
6、或PTU處理斷奶21天的大鼠后,首先分別測定以下指標:體重、卵巢重量、陰道開口日期、發(fā)情周期、血清激素濃度、卵巢組織形態(tài),然后在80日齡時與對照組進行對比,結果顯示:T4或PTU處理后的大鼠體重和卵巢重量都顯著下降,陰道開口日期推遲,發(fā)情周期紊亂;血清中T3和T4總濃度增加,但注射T4的大鼠血漿中E2和P4濃度下降,而注射PTU的大鼠血漿中T3、T4、E2和P4的濃度都較少。T4和PTU組卵巢內次級卵泡和有腔卵泡的數(shù)目都減少但有腔卵泡和
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