口腔新型GBR膠原膜的動(dòng)物體內(nèi)骨結(jié)合實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:北京奧精醫(yī)藥科技有限公司采用“仿生沉積”的最新方法制成的以膠原為主體的膠原膜，克服了以往膠原膜強(qiáng)度不足、降解過(guò)快難題，使得這一材料具有成為新一代骨增量手術(shù)GBR膜的可能。本實(shí)驗(yàn)擬進(jìn)行臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，對(duì)小型豬下頜骨制造骨缺損模型，放入新型膠原膜，以商品級(jí)Bio-Gide@膜為對(duì)照，在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)新型膠原膜及Bio-Gide@膜下骨缺損處的骨組織形態(tài)學(xué)進(jìn)行觀察和計(jì)量分析，為此新型膠原膜成為骨缺損骨增量手術(shù)的GBR膜提供可靠實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

2、。
　　方法:
　　1、實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:兩種新型膠原膜（本文命名為1號(hào)膠原膜、2號(hào)膠原膜）由北京奧精醫(yī)藥科技有限公司研發(fā)生產(chǎn)Co60照射滅菌后備用。Bio-Gide@膜和Bio-Oss@骨粉購(gòu)自Geistlich公司。
　　健康成年巴馬小型豬10頭，雄性，體重25-30kg。每只實(shí)驗(yàn)豬采用自身對(duì)照法，即左右兩邊分別植入新型膠原膜和Bio-Gide@膜，Bio-Oss@骨粉材料，10只巴馬小型豬隨機(jī)分為兩組，每組5只

3、分別在4周和12周兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)處死取材觀察結(jié)果。
　　2、手術(shù)植入與熒光標(biāo)記方法:將動(dòng)物麻醉后側(cè)臥位固定，消毒鋪巾，下頜骨外側(cè)切口，剝離至骨面，在下頜骨頦孔與咬肌前緣之間的下頜骨外側(cè)面，用調(diào)速手電鉆制備4個(gè)頰側(cè)骨皮質(zhì)全層1×1cm骨缺損，常規(guī)GBR手術(shù)，缺損腔填充Bio-Oss@骨粉，分別覆蓋1號(hào)膠原膜、2號(hào)膠原膜、Bio-Gide@膜、無(wú)膜覆蓋，鈦釘固位，去除骨膜，沖洗關(guān)閉創(chuàng)口。用同樣的方法在對(duì)側(cè)下頜骨做同樣GBR手術(shù)。
　

4、　各組動(dòng)物在處死前2周和1周分別肌肉注射二甲酚橙溶液和四環(huán)素溶液，用于熒光標(biāo)記。
　　3、不脫鈣硬組織切-磨片制作:各組材料取材后，經(jīng)固定、脫水、浸潤(rùn)、包埋制成塑料包埋塊。再使用硬組織切片機(jī)制成70-80μm厚的切片，并使用砂紙逐級(jí)磨片至30-40μm厚度。
　　4、骨組織形態(tài)學(xué)觀察:利用光學(xué)顯微鏡（包括熒光標(biāo)記、甲苯胺藍(lán)染色、亞甲基藍(lán)-酸性品紅染色）觀察骨缺損腔內(nèi)新骨生成情況。
　　5、骨組織形態(tài)計(jì)量分析:對(duì)熒光顯微

5、鏡，甲苯胺藍(lán)染色，亞甲基藍(lán)-酸性品紅染色的觀察結(jié)果進(jìn)行定量分析，檢測(cè)成骨面積、成骨密度、成骨速率以及成骨總量各項(xiàng)指標(biāo)。所有數(shù)據(jù)均用(X)±S表示，統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)均使用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，各組之間的比較根據(jù)正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)的結(jié)果選用t檢驗(yàn)或非參數(shù)檢驗(yàn)等方法檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
　　結(jié)果:
　　1、大體觀察:通過(guò)對(duì)兩種膠原膜和Bio-Gide@膜包覆骨粉植入物的結(jié)果觀察可見(jiàn)，三種植入物與骨組織結(jié)合緊密，膜表

6、面完整，未見(jiàn)炎癥反應(yīng)。隨著植入時(shí)間的增加，三種植入物完全被骨組織包繞，植入物與骨的邊界已經(jīng)難以分辨，植入物與骨幾乎融為一體，只植入骨粉的空白組，雖然未見(jiàn)炎癥反應(yīng)，但是沒(méi)有覆蓋任何膜的骨粉與周圍骨組織的結(jié)合不夠緊密，邊界處僅有少量新骨生成。
　　2、骨組織形態(tài)學(xué)觀察:4周時(shí)，三種膜覆蓋的植入體與周圍的骨組織結(jié)合緊密，表面均有結(jié)締組織包繞，膜未出現(xiàn)降解，膜周圍骨組織生長(zhǎng)迅速，骨礦化沉積活躍。無(wú)膜覆蓋的空白組，雖未見(jiàn)炎癥反應(yīng)不過(guò)骨粉周圍

7、骨組織生長(zhǎng)緩慢;12周時(shí)，三種膜覆蓋的內(nèi)部骨粉中均有大量骨組織，部分骨組織已經(jīng)較為成熟，未見(jiàn)膜降解區(qū)域，已經(jīng)出現(xiàn)一些較為粗壯成熟的骨小梁和骨單位;而無(wú)膜覆蓋的空白組僅出現(xiàn)少量骨組織。
　　2、骨組織形態(tài)計(jì)量分析:通過(guò)定量分析可知，隨著植入時(shí)間的增加，兩種新型膠原膜和Bio-Gide@膜的成骨面積、成骨密度和周成骨總量均增加，12周時(shí)三者的成骨面積相似。在周成骨總量和成骨速率指標(biāo)上，Bio-Gide@膜與1號(hào)膠原膜無(wú)顯著性差別(P＞