番茄抗病基因Sw-5b介導的抗TSWV轉基因本氏煙的研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩78頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、番茄斑萎病是一類分布廣泛，在許多植物上引起嚴重癥狀的病害，由布尼亞病毒科(Bunuyaviridae)番茄斑萎病毒屬(Tospovirus)典型成員番茄斑萎病毒(Tomatospotted wilt virus，TSWV)系統(tǒng)侵染引起。Sw-5b是一個有CC-（NB-ARC）-LRR結構的抗病基因，從秘魯番茄中克隆獲得，該抗病基因的番茄可以有效限制TSWV在番茄中的傳播，并有輕微的過敏性反應表現(xiàn)。
　　本研究采用轉基因技術將番茄抗

2、病基因Sw-5b轉入了本氏煙中。首先構建了含番茄抗病基因Sw-5b的載體p2300-Sw-5b，用葉盤法通過農桿菌轉化本氏煙，經過組織培養(yǎng)獲得轉基因本氏煙再生植株，初步進行了分子檢測和抗病性鑒定，結果如下:
　　Sw-5b農桿茸表達裁體的構建:在本研究中，我們設計了特異性的引物，從抗病番茄中克隆了3.7kb的Sw-5b基因，通過SmalⅠ和PstⅠ位點雙酶切插入改造過的農桿菌表達載體p2300（將原來的35S啟動子替換為SW-5b

3、的native啟動子），構好的載體經過PCR驗證后轉化至農桿菌GV3101，該農桿菌與舍有p2300-Nsm（表達TSWV NSm蛋白）的農桿菌共浸潤本氏煙葉片時，能夠引起超敏反應(HypersensitiveResponse，HR)，表明載體構建成功。
　　Sw-5b轉基因本氏煙的研究:我們將上述步驟構建的p2300-Sw-5b表達載體使用葉盤法轉化至本氏煙，通過T1代和性狀分離比判斷能發(fā)生HR的轉基因煙草都是純舍子。使用TSW

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論