納米銀-脫細胞真皮基質的制備及抗菌性能評價.pdf

1、[目的]1.探究納米銀溶液的最低抑菌濃度和最低殺菌濃度，進而對納米銀的抗菌性能進行評價;2.將脫細胞真皮基質與納米銀結合，制作一種兼具抗感染作用和促進創(chuàng)面組織再生作用的生物敷料。3.體外實驗評價納米銀/脫細胞真皮基質的抗菌殺菌效果。4.體外實驗評價納米銀/脫細胞真皮基質中銀的緩釋性能，評價納米銀/脫細胞真皮基質的抗菌殺菌效果的持久性。5.探究一種簡單可靠的動物燙傷模型，對不同深度的燙傷模型實驗條件進行探索。6.制作大鼠深Ⅱ°燙傷后感染動

2、物模型，評價納米銀/脫細胞真皮基質的抗感染和促進愈合的綜合作用。
　　 [方法]1.通過倍比稀釋法和基內接種法，測定了納米銀溶液對于金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌的最低抑菌濃度和最低殺菌濃度。2.通過浸漬吸附法將納米銀與脫細胞真皮基質結合，制備納米銀/脫細胞真皮基質。3.通過Kirby-Baucer抑菌環(huán)法比較不同濃度浸漬的脫細胞真皮基質的抑菌效果，進而評價納米銀/脫細胞真皮基質的體外抗菌效果。4.通過血漿浸漬法模仿創(chuàng)面滲出，檢測

3、浸漬不同時間后的納米銀/脫細胞真皮基質及血漿中納米銀含量，同時對浸漬后的納米銀/脫細胞真皮基質進行Kirby-Baucer抑菌環(huán)實驗，評價其緩釋性能。5.通過砝碼燙傷法探究大鼠不同深度燙傷的實驗條件，病理切片證實90℃燙傷15s可造成大鼠深Ⅱ°燙傷。應用創(chuàng)面定量涂菌法制備大鼠深Ⅱ°燙傷后創(chuàng)面感染動物模型，通過分組使用“醫(yī)用紗布”、“愛可欣”、“脫細胞真皮基質”、“納米銀/脫細胞真皮基質”，觀察使用不同敷料換藥創(chuàng)面痂下細菌計數(shù)、創(chuàng)面愈合率

4、、愈合等級、愈合天數(shù)四個指標，進一步評價了納米銀/脫細胞真皮基質的臨床抗感染和促進創(chuàng)面愈合效果。
　　 [結果]1.納米銀溶液對于金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌的最低抑菌濃度均為為8mg/L;納米銀溶液對于金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌的最低殺菌濃度分別為64mg/L和32mg/L;納米銀對于銅綠假單胞菌的殺菌效果可能優(yōu)于金黃色葡萄球菌。2.浸漬納米銀溶液48h后制備出納米銀/脫細胞真皮基質敷料，保留了脫細胞真皮基質的柔軟和彈性，電

5、鏡觀察其表面和內部均勻分布有大小均一的納米銀顆粒。3.相同的浸漬時間內，隨著浸漬納米銀濃度的升高，所得的納米銀脫細胞真皮基質的抑菌環(huán)逐漸增大:對于銅綠假單胞菌組，當浸漬濃度為7.8125mg/L及更高濃度組時納米銀脫細胞真皮基質組的抑菌環(huán)直徑將大于愛可欣組的抑菌環(huán)直徑，即抑菌效果優(yōu)于愛可欣;對于金黃色葡萄球菌，當浸漬濃度為15.625mg/L及更高濃度時納米銀脫細胞真皮基質組的抑菌環(huán)直徑將大于愛可欣組的抑菌環(huán)直徑，即抑菌效果優(yōu)于愛可欣。

6、4.愛可欣及納米銀/脫細胞真皮基質均能快速釋放納米銀，且納米銀/脫細胞真皮基質釋放速度快于愛可欣，浸漬5天后仍有較快的釋放速度。5.對于金黃色葡萄球菌組，納米銀/脫細胞真皮基質血漿中浸漬天數(shù)≤3天時，抗菌效果不遜于愛可欣;對于銅綠假單胞菌組，納米銀/脫細胞真皮基質血漿中浸漬天數(shù)≤5天時，抗菌效果仍不遜于愛可欣。6.通過砝碼燙傷制作出穩(wěn)定的大鼠燙傷模型:60℃(5s)、60℃(15s)、70℃(10s)、80℃(15s)、90℃(15s)

7、、100℃(15s)對應大鼠Ⅰ°、淺Ⅱ°、淺Ⅱ°、偏淺深Ⅱ°、偏深深Ⅱ°、Ⅲ°創(chuàng)面。7.制備出大鼠深Ⅱ°燙傷伴感染模型，納米銀/脫細胞真皮基質在創(chuàng)面痂下細菌計數(shù)、創(chuàng)面愈合率、愈合等級、愈合天數(shù)四個指標中均優(yōu)于愛可欣、脫細胞真皮基質、醫(yī)用紗布，進一步驗證了納米銀/脫細胞真皮基質的臨床抗感染和促進創(chuàng)面愈合效果。
　　 [結論]1.納米銀具有良好的抗菌作用。2.浸漬吸附法可用于制備納米銀/脫細胞真皮基質。3.納米銀/脫細胞真皮基質具有