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文檔簡介
1、目的:通過補充不同劑量的維生素E,研究大劑量維生素E對大鼠抗氧化能力和細胞功能的影響。
方法:取50只初斷乳Wistar大鼠,雌雄各半,將大鼠隨機分為對照組、VE1、VE2、VE3、VE4五組,五組大鼠每天給予不同劑量的維生素E灌胃,劑量分別為7.5 mg/kg、15mg/kg、50mg/kg、200mg/kg、750mg/kg,實驗周期為8周。實驗結束后處死動物并留取全血,分離血漿,同時制備紅細胞膜,進行抗氧化能力和細胞
2、功能的分析??寡趸芰Ψ治霭ㄑ獫{超氧化物歧化酶(SOD)活性測定、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性測定、丙二醛(MDA)含量分析及DNA氧化損傷。SOD、GSH-Px及MDA用生化試劑盒測定,DNA氧化損傷采用“彗星”電泳技術進行分析。細胞功能分析包括外周血淋巴細胞轉化率測定和紅細胞膜流動性測定。淋巴細胞轉化率測定應用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法,紅細胞膜流動性測定采用熒光偏振法。
結果:
1、抗氧
3、化能力分析結果顯示:當維生素E劑量為50mg/kg時,與對照組相比,大鼠血漿維生素E濃度提高了75.6%,SOD活性顯著升高(P<0.01),提高了14.9%,血漿和紅細胞膜中GSH-Px活性均明顯升高(P<0.05,P<0.01),分別提高了8.4%和51.1%,血漿和紅細胞膜MDA水平均明顯降低(P<0.01,P<0.01),分別比對照組下降了57%和47.2%。DNA氧化損傷分析結果顯示當H2O2濃度為10μ mol/1時,50m
4、g/kg VE組的DNA氧化損傷較對照組顯著降低(P<0.05)。當維生素E補充劑量為200mg/kg、750mg/kg時,與對照組相比,大鼠血漿維生素E水平分別提高了95.8%、117.5%,SOD活性明顯下降(P<0.05),而GSH-Px活性、MDA含量改善不明顯;與50 mg/kgVE組相比,SOD活性明顯下降(P<0.05),血漿和紅細胞膜GSH-Px活性均明顯降低(P<0.05),血漿和紅細胞膜MDA水平明顯升高(P<0.0
5、5)。DNA氧化損傷分析結果顯示當H2O2濃度為10μ mol/1時,200mg/kgVE組、750mg/kgVE組的DNA氧化損傷較對照組均顯著加重(P<0.01,P<0.01)。以上結果表明,當外界損傷因素作用于機體時,大劑量維生素E不僅沒有降低DNA氧化損傷,而且還使DNA氧化損傷加重,導致機體遺傳穩(wěn)定性受到破壞。
2、細胞功能分析結果顯示:當維生素E劑量為50mg/kg時,大鼠淋巴細胞轉化率和紅細胞膜流動性均比對照
6、組明顯提高(P<0.05,P<0.01),當維生素E補充劑量為200mg/kg、750mg/kg時,補充200mg/kgVE對細胞轉化率沒產(chǎn)生影響(P>0.05),細胞增殖功能無明顯變化,當補充劑量增加為750mg/kg時,與對照組相比,大鼠淋巴細胞轉化率顯著降低(p<0.05)。這兩個大劑量維生素E補充組對紅細胞膜流動性均未見明顯改善。
結論:
1、當維生素E補充劑量為50mg/kg時,機體SOD、GSH-
7、Px等抗氧化酶活性增強,血漿MDA水平降低;同時,過氧化氫誘發(fā)的DNA氧化損傷水平降低;大鼠紅細胞膜流動性和淋巴細胞轉化率提高。
2、當維生素E補充劑量為200mg/kg、750mg/kg時,血漿SOD活性降低,過氧化氫誘發(fā)的DNA氧化損傷加重;750mg/kg VE使淋巴細胞轉化率降低。而GSH-Px、MDA、紅細胞膜流動性等在這兩個大劑量補充組均未見明顯改善。
綜上,當維生素E補充劑量為50mg/kg時,
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