基于血液生理生化特性變化的屠宰場PSE豬肉在線快速檢測技術的研究.pdf

1、我國是全球第一大豬肉生產國，隨著規(guī)?；B(yǎng)殖的發(fā)展，曾困擾歐美發(fā)達國家多年的PSE肉問題在我國重現(xiàn)。與正常豬肉相比，PSE肌肉表面蒼白、質地松軟沒有彈性且汁液損失嚴重，其營養(yǎng)價值、食用風味和商品價值均有不同程度的下降。目前我國的豬肉產業(yè)主要以熱鮮肉銷售為主，屠宰場生產的豬胴體經過一級、二級批發(fā)市場進入農貿市場，然后再分割零售，而關于PSE肉的檢測方法主要有感官檢查、質構檢測、理化檢測和相關基因檢測（如氟烷基因）等，雖然這些方法可以有效的將

2、PSE肉檢測出來，但是它們只能在實驗室進行或者在屠宰完成以后針對肌肉本身進行，不能夠在屠宰場生產線上將可能攜帶有PSE肉的豬胴體提前檢測出來，PSE肉一旦流入市場，將會給企業(yè)帶來嚴重的經濟損失。因此，如何避免PSE肉出廠，減少屠宰企業(yè)經濟損失成為現(xiàn)代肉類工業(yè)亟需解決的難題。PSE肉主要由宰前處理過程中產生的應激導致，如屠宰季節(jié)、運輸、待宰時間和致暈方式等，而應激直接影響生豬血液成分的變化，因此生豬的各項血液生理生化指標可以敏感而準確地反

3、映機體的應激程度，可能對PSE肉的發(fā)生有一定的指示作用。本論文主要研究不同質量豬肉對應的血液生理生化指標，通過建立血液生理生化指標與PSE肉的聯(lián)系，篩選出血液生理生化指標中表征PSE肉的生物標志，然后針對該生物標志建立適用于生豬在線屠宰的快速檢測方法，并用判別分析建立對不同程度發(fā)生的PSE肉的分類預測模型。
　　試驗一:隨機選取宰前檢驗健康合格的杜×長×大三元雜交豬200頭，體重115±5 kg，分別采取每頭豬的背最長肌，測定相關

4、指標，進行PSE肉的判定，同時分別采集其對應的血液樣本，進行血清生化指標測定，然后使用單因素分析和主成分分析對不同質量豬肉對應的血液生理生化指標進行分析。結果表明:該屠宰場200頭豬中有15頭豬產生PSE肉，冬季PSE肉發(fā)生率為7.5％;與正常豬血清生化指標相比，攜帶PSE肉的生豬血清中AST、CK、LDH、LAC和GLU水平顯著升高(P＜0.05)，PSE情況生豬血液中AST水平為161.83±51.51 U/L，CK水平為12380

5、±5030 U/L，LDH水平為2050±1240 U/L，GLU濃度為8.26±2.50mmol/L， LAC濃度為17.18±1.87mmol/L，而正常豬血液中AST水平為75.75±24.06U/L，CK水平為4240±1440 U/L，LDH水平為640±110 U/L，GLU濃度為6.55±0.98 mmol/L，LAC濃度為10.84±2.27mmol/L，其他指標均無顯著差異(P＞0.05);通過主成分分析對200個血清

6、樣本分析，從PCA得分圖上可知，正常豬血清樣本和攜帶PSE肉的血清樣本分別聚集在兩個區(qū)域，可以被主成分得分圖區(qū)分開，從因子載荷和得分雙重信息圖上可知，血液中AST、CK、LDH、LAC和GLU的水平對PSE情況血液樣本和正常血液樣本的區(qū)分有決定性的作用，與PSE肉的發(fā)生有著緊密的聯(lián)系。研究結果表明，血液中AST、CK、LDH、LAC和GLU可以表征PSE肉的發(fā)生，可以作為PSE肉的生物標志。
　　試驗二:隨機選取宰前檢驗健康合格的

7、杜×長×大三元雜交豬48頭，體重115±5 kg，分別采集其對應的血液樣本，分離血清，用全自動生化儀測定其PSE肉生物標志，篩選出低中高濃度樣本各4個，然后分別采用建立的連續(xù)監(jiān)測法來測定AST、CK和LDH，紫外酶動力學法和己糖激酶法分別測定LAC和GLU，并以全自動生化儀測定結果為基準對其進行評價，結果表明實驗方法結果與全自動生化儀測定結果相關性較好，變異系數均小于5％，回收率均在95％～，105％之間，該方法準確度和精度均滿足要求，

8、且反應用時較短。與全自動生化儀測定血液生化指標相比，在保證測定結果準確、重復性好的前提下，該實驗方法不需要昂貴儀器，且操作簡單靈活，能夠更準確穩(wěn)定地應用于PSE肉生物標志的在線快速測定。
　　試驗三:隨機選取宰前檢驗健康合格的杜×長×大三元雜交豬500頭，體重115±5 kg，分別收集每頭豬的血液并采取對應的背最長肌，對肉品質進行判定，分為正常肉、輕度PSE肉、中度PSE肉和重度PSE肉，篩選出35個攜帶不同品質肉的豬，并采集對應

9、35個血清樣本，其中25個做為建模樣品，10個做為預測樣品，同時使用第二章中建立的在線快速檢測方法測定血清PSE肉生物標志，然后分別利用Fisher判別和Bayes判別對25個不同質量豬肉的血清樣本（正常肉、輕度PSE肉、中度PSE肉和重度PSE肉）的PSE肉生物標志進行判定，建立判別分析模型，F(xiàn)isher判別函數為:
　　F1=0.007X1+0.530X2-0.095X3+0.001X4+0.001X5-12.66
　　

10、F2=0.002X1+0.636X2+0.461X3+0.001X4-0.005X5-9.742
　　正常肉對應血清樣本的重心為(-6.578，-1.511)，輕度PSE肉對應血清樣本重心為(-2.816，1.088)，中度PSE肉對應血清樣本的重心為(2.274，3.047)，重度PSE肉對應血清樣本的重心為(12.945，-1.633)。
　　Bayes判別函數為:
　　D1=0.096X1+11.027X2+3.

11、913X3+0.008X4-0.037X5-63.698
　　D2=0.132X1+15.506X2+4.225X3+0.013 X4-0.049X5-119.580
　　D3=0.168X1+18.392X2+5.309X3+0.018X4-0.050X5-205.344
　　D4=0.239X1+21.543X2+1.837X3+0.022X4-0.014X5-372.625
　　Fisher判別模型和Bay

12、es判別模型對不同品質豬肉對應血清樣本和未知類別血清樣本的判定正確率均為100％，無一例錯判。結果表明該判別模型能夠很好的將不同質量豬肉的血液樣本判定出來，可以有效的應用于屠宰場PSE肉的在線檢測。
　　試驗四:隨機選取宰前檢驗健康合格的杜×長×大三元雜交豬500頭，體重115±5 kg，使用PSE肉在線快速檢測技術來預判可能攜帶PSE肉的豬胴體，通過測定肌肉指標和屠宰場完善的追蹤系統(tǒng)進行驗證。試驗結果表明，該技術對PSE肉的總判