家蠶Nd裸蛹基因的精細定位及候選基因分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、江蘇科技大學碩士學位論文家蠶Nd裸蛹基因的精細定位及候選基因分析姓名：梅興林申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：李木旺；汪生鵬20110603江蘇科技大學理學碩士學位論文VIAbstractThe‘Nakedpupa’(Nd)mutantofsilkwmwhichwasiginatedfromnaturalmutationwasinitiallyfoundfromstrainsofEuropebyNakanoin195

2、1.ThelarvaofNdmutantcan’tspinacocoonspinverypococoonwhichonlycotainssericin.ThephenotypeofNdmutantcanpupatenmallyishereditary.FourhereditarymaterialsofNakedpupahavebeenfoundwhichareNdNd(2)NdsNdsD.TheNdgeneNd(2)genearelin

3、kedwithFibHgenewhichlocatedonthe25thchromosomehowevertheNdsgeneNdsDgenearelinkedwithFibLgenewhichlocatedonthe14thchromosome.Withthedevelopmentofmolecularbiotechnolgymolecularmarkersiswidelyappliedinthesilkwm.Moleculargei

4、cmappingofsilkwmlaysasolidfoundationfthepositionalcloningofgenes.XiaoboYangconstructedinitialgeiclinkagemapofNdgeneusingtheconstructedsimplesequencerepeat(SSR)molecularmarkerlinkagemaps7SSRmarkerswerefoundtobelinkedwithN

5、dgene.Meanwhile2closelylinkedSSRmarkersnamedS2513S2511werefound.TolearnmeaboutthefunctionmechanismoftheNdgeneweperfmedfinemappingoftheNdgeneusingSSRSTSCAPSmarkersinthefoundationofpreliminarymapping2STSmarkers4CAPSmarkers

6、werefound，namedSTS12、STS126、CAPS080、CAPS079、CAPS124CAPS029.Byfinemappingwesucceededinnarrowingthecidateregiontoapproximately170kb.NorecombinantindividualehadbeendetectedbythemarkerCAPS29whichmeanttheNdgeneislocatedaround

7、CAPS29.TheCDSESTswithinthemappingregionwereblastedinSilkDBKaikoBase.MutationdetectionAnalysisofexpressionwereaccomplishedbysequencingsemiquantitativeRTPCR.FinallyagenenamedG1740whichwasscreenedfromcidateregionwasfoundtoh

8、avealternativesplicingbetweenwildtypemutant.ThisgenemayassociatewithmechanismoftheNdgene.CloningofNdgenestudyingontheoccurringmechanismofNdwouldnotonlybegoodfresearchingofmolecularmarkassistedbreedingbutalsocanbuildanewt

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