酶法制備絲素肽-含銀介孔生物玻璃復合材料的結構與止血性能研究.pdf

1、在戰(zhàn)場上和在日常事故當中，不受控制的出血是導致死亡的主要原因。因此研究新型止血材料并如何快速有效的止血一直以來都是非常熱門的話題。絲素蛋白是一種天然纖維材料，具有人體中必要的數種氨基酸，對機體無毒、無刺激作用，可生物降解;此外絲素蛋白還可以根據需要加工成各種形態(tài)的材料，通過不同的化學試劑改性，具有很大的可塑性，廣泛應用于紡織行業(yè)、生物醫(yī)藥領域。為進一步拓寬蠶絲蛋白生物醫(yī)藥材料領域中的應用，本文主要研究了酶法制備絲素肽的結構與止血性能。<

2、br>　　首先采用堿性蛋白酶Alcalase、復合風味酶Flavourzyme、復合蛋白酶Protamex和胃蛋白酶Pepsin水解絲素蛋白，在此基礎上，采用堿性蛋白酶Alcalase與復合風味酶Flavourzyme（制備的絲素肽用AF表示）、復合蛋白酶Protamex與復合風味酶Flavourzyme（制備的絲素肽用PF表示）的組合來分步酶解絲素蛋白制備6種絲素肽。采用場發(fā)射掃描電子顯微鏡(FESEM)、傅里葉紅外光譜儀(FTIR)

3、、X射線衍射儀（XRD）、Zeta電位測試儀等對6種絲素肽的形貌結構和性能進行測試和表征。通過血液粘度實驗、血小板粘附實驗、體外凝血時間等體外凝血實驗對絲素肽的止血性能進行評價，并通過大鼠肝臟止血模型驗證其止血效果。最后，為了進一步提升酶解絲素肽止血材料的止血性能，將堿性蛋白酶Alcalase制備的絲素肽與含銀的介孔生物玻璃材料按5％，10％，15％，20％的比例共混制備復合止血材料，研究其結構和止血抗菌性能。主要研究結果表明:

4、　　1、體外血液實驗結果和大鼠肝臟止血模型表明，制備的4組絲素肽都有一定的止血效果，且止血效果比市售明膠海綿好，其中Alcalase組絲素肽止血效果最好，Flavourzyme組絲素肽與Protamex組絲素肽止血效果相近，Pepsin組絲素肽止血效果稍差。由于制備的4組絲素肽表面具有孔狀形貌，包含無規(guī)卷曲結構，使得4組絲素肽具有良好的吸水性能，加速凝血。同時，4組絲素肽帶有負電勢，能夠快速激活凝血酶，縮短凝血時間，促進凝血。
　

5、　2、雙酶制備絲素肽的止血效果比單一Flavourzyme制備絲素肽好。由于AF組絲素肽表面有很多均勻細小的孔隙，PF組絲素肽表面的孔隙較大，兩組絲素肽以β-折疊為主，包含無規(guī)卷曲結構，使得雙酶制備絲素肽具有良好的吸水性能并帶有更大的負電勢，提高血液粘度，促使血小板在絲素肽表面聚集，有利于凝血。
　　3、復合止血材料的止血抗菌性能優(yōu)于單一Alcalase酶制備絲素肽。加入含銀介孔生物玻璃后，復合止血材料表面逐漸變的粗糙，孔隙增多，