糧食水溶性蛋白結合膽酸鹽能力及膽酸鹽免疫檢測方法的研究.pdf

1、提取稻谷、小麥、大豆、玉米、馬鈴薯和甘薯等6種主要糧食水溶性蛋白,分析它們的組成特點及其在體外與膽酸鹽吸附的能力。大豆水溶性蛋白含量最高,小麥次之,馬鈴薯最低;稻谷、大豆和小麥的水溶性蛋白種類多,而甘薯的種類最少。各樣品的水溶性蛋白對膽酸鈉、脫氧膽酸鈉和牛磺膽酸鈉都具有結合作用。在相同質量蛋白質的情況下,小麥水溶性蛋白結合膽酸鹽的能力最強,而馬鈴薯、甘薯的水溶性蛋白結合膽酸鹽的能力則顯著性低于其他樣品。這些糧食水溶性蛋白結合膽酸鹽能力的

2、差異主要與蛋白種類數和組成有關,低相對分子質量的水溶性蛋白對膽酸鹽的結合能力可能比高相對分子質量的水溶性蛋白更強。
　　食物中的可溶性淀粉和維生素 C對糧食水溶性蛋白結合膽酸鹽的能力有一定的影響,同等質量下,除小麥水溶性蛋白以外,其余五種糧食水溶性蛋白與可溶性淀粉混合后,吸附膽酸鹽的能力均增強;六種糧食水溶性蛋白與維生素 C混合后吸附膽酸鹽的能力均得到提高,但均低于維生素 C對膽酸鹽的結合量,除小麥水溶性蛋白以外。其中可溶性淀粉和

3、維生素 C對甘薯水溶性蛋白的影響最為顯著。可溶性淀粉使甘薯水溶性蛋白結合膽酸鹽的能力提高3.73倍;同時維生素C使甘薯水溶性蛋白結合膽酸鹽的能力提高6.3倍?？扇苄缘矸叟c小麥蛋白混合后使小麥結合膽酸鹽的能力降低45.9％。
　　使用碳化二亞胺法成功制備牛磺膽酸鈉完全抗原?；悄懰徕c-牛血清白蛋白(STC-BSA)和包被抗原?；悄懰徕c-卵清蛋白(STC-OVA),用紫外分光光度法鑒定合成結果。免疫Balb/c小鼠,獲得抗STC-BSA

4、的多克隆抗體血清,效價為6.4×10<'4>。初步建立了間接競爭ELISA測定STC的標準曲線,線性方程式為y=-22.8x+112.3,R2=0.9888。靈敏度約為0.5μg/L,檢測限約為9.33μg/L,工作范圍為9.33-30200μg/L。以250μg/mL-3000μg/mL濃度添加時,脫脂牛奶的加標實驗回收率為76.2%～108.5%之間,變異系數為1.9%～3.7%,為檢測血清以及食品中?；悄懰徕c的含量提供了一種微量、