Pygo2-miRNA在人腦膠質(zhì)瘤的表達及作用機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、Pygo2蛋白作為Wnt信號通路下游新功能蛋白，其表達紊亂與人腦膠質(zhì)瘤惡性程度密切相關(guān)，調(diào)控機制非常復雜，很多機制尚不清楚。本實驗旨在探討人腦膠質(zhì)瘤中異常表達的miRNA對Pygo2蛋白的可能調(diào)控作用。
　　目的：研究miRNA靶向Pygo2在人腦膠質(zhì)瘤的表達及作用機制
　　方法：利用生物信息學預測軟件（targetscan，miRanda，PicTar等）預測Pygo2的miRNAs，進而通過人腦膠質(zhì)瘤miRNA表達譜芯片

2、檢測系統(tǒng)篩選候選的靶向Pygo2-3'UTR的miRNAs。針對差異表達最大的miRNA，首先構(gòu)建成含有突變位點Pygo2-3'UTR的熒光素酶報告載體，然后利用Pygo2-miRNA過表達質(zhì)粒下調(diào)Pygo2，從而抑制膠質(zhì)瘤細胞的增殖及侵襲。
　　結(jié)果：生物信息學預測軟件預測出37個與Pygo2相關(guān)的miRNAs，結(jié)合人腦膠質(zhì)瘤miRNA表達譜芯片低表達結(jié)果，發(fā)現(xiàn)Pygo2可能受包括miR-31、miR-34c-5p、miR-19

3、5、miR-214在內(nèi)13個miRNAs調(diào)控。熒光素酶報告基因活性、real-time PCR驗證及western blot實驗提示，與其余miRNAs相比，miR-214最有可能在人腦膠質(zhì)瘤細胞中調(diào)控Pygo2的表達。在體外上調(diào)miR-214的表達引起膠質(zhì)瘤細胞增殖、侵襲力降低。
　　結(jié)論：首次發(fā)現(xiàn)人腦膠質(zhì)瘤中Pygo2的過表達可能與miR-214相關(guān)，miR-214能夠通過下調(diào)Pygo2基因的表達抑制腦膠質(zhì)瘤細胞的增殖和侵襲，

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