地塞米松聯(lián)合1,25-二羥維生素D3對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞化療敏感性的影響.pdf

1、目的:
　　觀察地塞米松(DEX)、1,25-二羥維生素D3[1,25(OH)2D3]及順鉑(DDP)對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及對(duì)維生素D受體(VDR)表達(dá)水平的影響。
　　方法:
　　體外傳代培養(yǎng)人肺腺癌 A549細(xì)胞,利用 MTT法檢測(cè) DEX、1,25(OH)2D3及 DDP對(duì) A549細(xì)胞增殖的影響;流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定 DEX和1,25(OH)2D3及DDP對(duì)A549細(xì)胞周期及凋亡的影響;W

2、estern Blot檢測(cè)DEX和1,25(OH)2D3及DDP對(duì)A549細(xì)胞內(nèi)VDR表達(dá)水平的影響。
　　結(jié)果:
　　1. DDP單藥濃度在0.3125~10μg/ml范圍內(nèi)對(duì)A549細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用,呈濃度及時(shí)間依賴(lài)性(P<0.05)。DEX單藥500nM及1000nM對(duì) A549細(xì)胞增殖有明顯抑制作用,呈濃度及時(shí)間依賴(lài)性(P<0.05);DEX單藥濃度低于500nM時(shí),對(duì) A549細(xì)胞無(wú)明顯抑制作用,反而可以促

3、進(jìn)A549細(xì)胞增殖(P>0.05)。1,25(OH)2D3單藥濃度在1~100nM范圍內(nèi)對(duì)A549細(xì)胞增殖的抑制作用與濃度無(wú)明顯依賴(lài)關(guān)系(P>0.05),但與作用時(shí)間密切相關(guān)(P<0.05),且1,25(OH)2D350nM作用72h時(shí)對(duì)A549細(xì)胞抑制作用最顯著。
　　2. DDP聯(lián)合DEX或1,25(OH)2D3較各單藥對(duì)A549細(xì)胞增殖抑制作用顯著(P<0.05)。且與DDP及DEX濃度及作用時(shí)間呈依賴(lài)性(P<0.05)。D

4、EX、1,25(OH)2D3及DDP三藥聯(lián)合使用對(duì)A549細(xì)胞增殖抑制作用最顯著(P<0.05)。
　　3.聯(lián)合DEX時(shí),DEX不同的處理方式對(duì)A549細(xì)胞增殖抑制作用不同,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其中DEX預(yù)處理24h組較DEX與藥物同時(shí)處理組或無(wú)DEX處理組抑制作用更顯著(P<0.05)。
　　4.流式檢測(cè)DEX、1,25(OH)2D3及DDP處理24h后的A549細(xì)胞,與對(duì)照組相比,DDP組、DDP+1,2

5、5(OH)2D3組、DDP+1,25(OH)2D3+DEX組G1期細(xì)胞比例下降(P<0.05),S期比例上升(P<0.05),G2/M期比例下降(P<0.05),細(xì)胞凋亡數(shù)目增加(P<0.05),其中 DDP+1,25(OH)2D3+DEX組最顯著(P<0.05)。
　　5. Western Blot檢測(cè)DEX、1,25(OH)2D3及DDP處理48h后的A549細(xì)胞,與對(duì)照組相比,1,25(OH)2D3組、DDP+1,25(OH

6、)2D3組、DDP+DEX組、DDP+1,25(OH)2D3+DEX組細(xì)胞內(nèi)VDR表達(dá)明顯增加(P<0.05),其中DDP+1,25(OH)2D3+DEX組細(xì)胞內(nèi)VDR增加最明顯(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1. DEX及DDP對(duì)A549細(xì)胞均有抑制作用,且呈濃度及時(shí)間依賴(lài)性,而1,25(OH)2D3對(duì)A549細(xì)胞的抑制作用無(wú)明顯濃度依賴(lài)性,但有一定的時(shí)間依賴(lài)性。
　　2. DEX聯(lián)合1,25(OH)2D3可顯著