1,25(OH)2D3通過(guò)抑制NLRP3炎癥小體激活保護(hù)高糖誘導(dǎo)的胰島β細(xì)胞功能障礙.pdf

1、研究目的:
　　糖尿病是一種以高血糖為主要特征的代謝性疾病,主要病理生理基礎(chǔ)是胰島素分泌或作用不足引起的糖、蛋白質(zhì)和脂肪代謝紊亂并繼發(fā)水、電解質(zhì)代謝失衡。胰島素β細(xì)胞是機(jī)體分泌胰島素的唯一細(xì)胞,其數(shù)量、體積和功能狀態(tài)決定了胰島素分泌的水平,對(duì)維持體內(nèi)血糖的動(dòng)態(tài)平衡具有重要作用。因此,探討胰島β細(xì)胞功能障礙的機(jī)制和探索新的預(yù)防、治療方法具有重要意義。維生素D3除了傳統(tǒng)的維持機(jī)體鈣磷穩(wěn)態(tài)之外,具有廣泛的非調(diào)鈣生物學(xué)效應(yīng)。 本研究

2、從臨床調(diào)查、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)三個(gè)層面探討維生素D3水平和胰島β細(xì)胞功能的關(guān)系、維生素D3是否具有保護(hù)高糖狀態(tài)下胰島β細(xì)胞功能障礙的作用以及可能的機(jī)制。
　　研究方法:
　　臨床調(diào)查:選取556名2011年1月至2012年4月在上海市第六人民醫(yī)院糖尿病臨床中心門診就診的受試者,其中78名正常糖耐量者(NGT),59名1型糖尿病(T1DM)患者,419名2型糖尿病(T2DM)患者。比較三組之間血清中25(OH)D3的水平,并根

3、據(jù)糖尿病分型分組探索維生素D水平與各組間胰島β細(xì)胞功能的關(guān)系。由于性別對(duì)血清25(OH)D3的影響,在2型糖尿病人群中對(duì)男女分別進(jìn)行分析。
　　動(dòng)物實(shí)驗(yàn):分別普食和高糖飲食喂養(yǎng)雄性SD大鼠,同時(shí)給予維生素D3干預(yù)(233.3U/kg/wk)。5周后腹腔葡萄糖耐量試驗(yàn)(IPGTT)檢測(cè)糖耐量受損模型造模效果,并觀察維生素D3對(duì)血糖和胰島素分泌的影響。
　　細(xì)胞實(shí)驗(yàn):首先檢測(cè)1,25(OH)2D3對(duì)INS-1E細(xì)胞和離體SD大鼠

4、胰島葡萄糖刺激的胰島素分泌(GSIG)的影響。 INS-1E細(xì)胞分別進(jìn)行低糖(5.6mmol/L)和高糖(30mmol/L)孵育48h,同時(shí)給予1,25(OH)2D3干預(yù),檢測(cè)1,25(OH)2D3對(duì)INS-1E細(xì)胞活性氧(ROS)生成、凋亡的影響,并探討其可能的機(jī)制。
　　研究結(jié)果
　　臨床調(diào)查:NGT、T1DM及T2DM組維生素D缺乏的比例分別為85.9％、93.9％及88.5％。T1DM患者血清25(OH)D3水平顯著

5、低于NGT對(duì)照組及T2DM人群。維生素D水平存在顯著性別差異,男性血清25(OH)D3水平顯著高于女性受試者。血清25(OH)D3水平與1型糖尿病患者FCP水平獨(dú)立相關(guān),與男性T2DM患者2h-0CP水平獨(dú)立相關(guān),與女性T2DM患者2hCP水平相關(guān)。
　　動(dòng)物實(shí)驗(yàn):與普食喂養(yǎng)大鼠相比,經(jīng)過(guò)5-6周高糖飲食喂養(yǎng)大鼠體重顯著增加,且糖負(fù)荷后血糖水平明顯較高。同時(shí)給予維生素D3干預(yù)發(fā)現(xiàn),與高糖喂養(yǎng)組相比,維生素D3干預(yù)能顯著降低糖負(fù)荷后

6、血糖水平并升高胰島素水平。
　　細(xì)胞實(shí)驗(yàn):1,25(OH)2D3能顯著提高INS-1E細(xì)胞及離體胰島的GSIS水平;高糖孵育48h顯著增加INS-1E細(xì)胞的ROS產(chǎn)生、凋亡。1,25(OH)2D3能顯著降低高糖誘導(dǎo)的NLRP3基因和蛋白表達(dá)增加,同時(shí)降低NLRP3炎癥通路其他蛋白包括ASC、TXNIP、IL-1β和IL-18的表達(dá)。
　　研究結(jié)論:
　　1.血清25(OH)D3水平與1型糖尿病患者和男性2型糖尿病患者胰