鞘內(nèi)注射氟代檸檬酸對骨癌痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用.pdf

1、本文分為三部分進(jìn)行論述： 第一部分大鼠骨癌痛動物模型的建立。 目的：通過行為學(xué)、放射學(xué)、病理學(xué)等方法，建立并評價(jià)大鼠骨癌痛模型。 方法：將大鼠腹水傳代培養(yǎng)的Walker-256腫瘤細(xì)胞，種植于SD大鼠左側(cè)脛骨上端，建立骨癌痛動物模型。16只SD大鼠隨機(jī)分為2組(每組8只)：假手術(shù)組(sham緝)和骨癌痛組，分別于左側(cè)脛骨注射Hanks液和Walker-256腫瘤細(xì)胞。于注射前1天、注射后1、3、7、14、21天觀

2、察大鼠的體重和疼痛痛行為學(xué)的變化。疼痛行為學(xué)包括以von Frey纖維絲刺激足底測量機(jī)械縮足閾值(PWMT)、熱輻射縮足反射潛伏期(TWL)、行走后足使用評分。骨癌痛組大鼠于建模后第6、12、18天進(jìn)行X線檢查評估脛骨破壞程度，第21天取罹患腫瘤的脛骨進(jìn)行組織切片，HE染色光鏡下觀察腫瘤組織和骨結(jié)構(gòu)破壞情況。 結(jié)果： 1)：骨癌痛組大鼠在建模后第14、21天的體重與基礎(chǔ)值和假手術(shù)組比較顯著下降(P<0.01)，而假手術(shù)組

3、大鼠體重與基礎(chǔ)值比較增加(P<0.05)。 2)骨癌痛組大鼠從建模后第5天開始，車后爪PWMT顯著降低，低于術(shù)前的基礎(chǔ)值(P<0.01)，并持續(xù)下降至建模后第21天；與假手術(shù)組和基礎(chǔ)值比較差異明顯(P<0.01)；骨癌痛組大鼠術(shù)后第3天左后爪TWL下降，與假手術(shù)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，第5～21天，骨癌痛組大鼠TWL值又逐漸恢復(fù)，與假手術(shù)組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O．05)；骨癌痛組大鼠第14天開始出現(xiàn)行走

4、使用評分下降，與基礎(chǔ)值和假手術(shù)組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 3)骨癌痛組大鼠左側(cè)脛骨X線攝片可見明顯的骨破壞，左脛骨病理切片顯示腫瘤細(xì)胞生長。 結(jié)論：疼痛行為學(xué)、放射學(xué)、組織學(xué)多方面研究的結(jié)果表明大鼠骨癌痛模型建立成功。 第二部分脊髓膠質(zhì)細(xì)胞在脊髓癌痛中的作用。 目的：通過免疫組化方法觀察脊髓膠質(zhì)細(xì)胞在脊髓的表達(dá)，探討脊髓膠質(zhì)細(xì)胞在骨癌痛成因中的作用。 方法：20只SD大鼠分為2組

5、：假手術(shù)組(n=5)和骨癌痛組(n=15)，骨癌痛組分別在術(shù)后第7d、14d、21d各處死5只大鼠取腰段脊髓，假手術(shù)組術(shù)后7d取腰段脊髓。采用免疫組化方法分別測定脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志物膠質(zhì)纖維酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein，GFAP)和小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物OX-42陽性細(xì)胞在脊髓的表達(dá)。 結(jié)果： 1)術(shù)后第7天骨癌痛組大鼠脊髓GFAP表達(dá)開始增加，至第14天明顯增加，持續(xù)增加至術(shù)后

6、21天，與假手術(shù)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 2)術(shù)后第7天骨癌痛組大鼠脊髓OX-42表達(dá)開始增加，至第14天明顯增加，持續(xù)增加至術(shù)后21天，與假手術(shù)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論：骨癌痛大鼠脊髓膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)隨著病程的發(fā)展逐漸增加，表明脊髓膠質(zhì)細(xì)胞可能參與了大鼠骨癌痛的形成。 第三部分鞘內(nèi)注射氟代檸檬酸對骨癌痛大鼠痛閾的影響。 目的：研究特異性膠質(zhì)細(xì)胞代謝抑制劑氟代檸檬酸(

7、Fluorocitrate，F(xiàn)C)對骨癌痛大鼠機(jī)械痛閾的影響。 方法：12只大鼠隨機(jī)分為2組，PBS組，骨癌痛模型十PBS組：FC組，骨癌痛模型十FC組。大鼠骨癌痛模型建立后當(dāng)天鞘內(nèi)置管，置管后14d鞘內(nèi)分別注射PBS10μl、FC1nmol(10μl)，給藥前1h(baseline)和給藥后1、2、4、6、8、10、12、24h測定機(jī)械縮足反射閾值(Paw withdrawl mechanical threshold，PWMT