辛伐他汀對TNBS誘導的大鼠結腸炎Th17-Treg平衡的調節(jié)作用.pdf

1、目的:炎癥性腸病是腸道黏膜慢性復發(fā)性炎癥，其機制不是很清楚，免疫反應異常是其主要機制之一。他汀類藥物是HMG-CoA抑制劑，許多研究顯示該類藥物可作用于不同的免疫反應途徑，因此能夠參與免疫的調節(jié)。采用TNBS復制結腸炎模型，探討Th17及Treg細胞失衡在其發(fā)病過程中的作用，并采用辛伐他汀干預，了解其在實驗性結腸炎中的干預效應并探討作用機理。
　　方法:40只雄性SD大鼠，隨機分5組:對照組（N組）、模型組（TNBS組）、辛伐他汀

2、分為低劑量(SL組，5mg/kg)和高劑量(SH組，20mg/kg)兩個組、柳氮磺嘧啶組(SASP組，400mg/kg)。后四組小鼠用5％TNBS+50％乙醇(v/v)溶液復制大鼠急性結腸炎模型，SL組和SH組在造模后分別灌胃不同劑量的辛伐他汀溶液，TNBS模型組在造模后使用相同量的生理鹽水灌胃，一天一次，對照組大鼠經直腸灌注等容積的0.9％Nacl溶液后每天灌胃0.9％Nacl溶液2ml，連續(xù)7d。實驗過程中，觀察相關指標，每天記錄并

3、觀察各組大鼠DAI評分，干預7d后，采集標本并肉眼觀察結腸粘膜病變程度，行CMDI評分，HE染色后觀察病理改變，并行TDI評分，以酶聯免疫法(ELISA)檢查血清中IL-17及IL-22、IL-10的水平，以免疫組化法檢測結腸組織中IL-17、Foxp3的表達，RT-PCR檢查結腸組織RORγt、Foxp3 mRNA表達量。組間比較采用單因素方差分析。
　　結果:1、與對照組比較，模型及各干預組DAI、CDMI及TDI評分均升高，

4、差異顯著，具統(tǒng)計學意義，表明復制結腸炎模型成功。2、ELISA法檢測TNBS組及各治療組中大鼠血清中IL-17、IL-22水平，與對照組之間相較，顯著升高，各個組之間相較，有顯著差異(P=0.000)，不同治療組與TNBS組之間比較，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。各治療組及TNBS組IL-10水平較對照組升高，差異有意義(P＜0.05)，不同治療組與TNBS組比較明顯升高，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。3、免疫組化法結果顯示:7天后，檢

5、測各組結腸粘膜組織IL-17表達，差異有意義(P＜0.05)。TNBS組IL-17表達量升高，與對照組相比較，具統(tǒng)計學差異(P=0.000)。TNBS組與SH組比較，有統(tǒng)計學意義(P=0.002)，與SL及SASP組比較差異無意義。給藥后各組大鼠結腸粘膜Foxp3表達，差異具顯著性(P=0.000)，與對照組相比，TNBS組中Foxp3的表達量升高，有統(tǒng)計學意義(P=0.010)。TNBS與SH組比較，有顯著差異(P=0.000)，而與

6、SL、SASP組相比較，無意義。4、對照組的結腸粘膜中RORγt及Foxp3較少量的表達。TNBS組中RORγtmRNA表達量較對照組明顯升高，而SH組干預后，RORγtmRNA的表達顯著低于TNBS組(P＜0.05)。TNBS組Foxp3有一定程度表達，經過治療后，Foxp3 mRNA表達量明顯上調，組間比較，差異具意義(P=0.000)。
　　結論:1、Th17/Treg之間平衡失調與TNBS復制的結腸炎的發(fā)病過程相關。2、辛