p53在慢性低壓低氧性肺動脈高壓形成中的作用.pdf

1、本研究采用動物實驗和細胞培養(yǎng)相結(jié)合的方法，復制低氧性肺動脈高壓(hypoxicpulmonaryhypertension，HPH)的動物模型和PASMCs增殖模型，同時應(yīng)用免疫熒光組織化學法、流式細胞術(shù)、Western-blot、RT-PCR等成熟的分子生物學方法和細胞凋亡檢測法，檢測HPH時mtp53分子表達及蛋白含量變化，觀測PASMCs的增殖和凋亡變化，觀察mtp53與PASMCs增殖、凋亡的關(guān)系。用放射免疫法觀察CGRP在慢性H

2、PH中的動態(tài)表達變化，探索其對肺動脈高壓的治療作用。 本研究觀測到：在低壓、低氧性慢性PAH大鼠的肺小動脈壁細胞增殖的過程中，細胞凋亡也顯著增加，并且凋亡細胞數(shù)隨低氧時間延長而增加。因此推論，在慢性HPH時，在VSMCs增殖活性升高的同時，細胞凋亡也有所增強，其生理意義在于試圖從整體上維持平滑肌細胞數(shù)目的動態(tài)平衡。在用低氧刺激離體培養(yǎng)的PASMCs時，發(fā)現(xiàn)細胞增殖顯著增加，但細胞凋亡無明顯變化，說明離體狀態(tài)下，低氧誘導的PASM

3、Cs增殖的過程不伴有細胞凋亡的改變。整體水平和離體細胞水平實驗結(jié)果的差異，提示低氧時整體水平PASMCs凋亡增加是神經(jīng)、體液因素作用的結(jié)果，而非低氧的直接結(jié)果?？傊?，PASMCs異常增殖大于凋亡可能是HPH形成過程中發(fā)生肺血管重塑的主要原因之一。 mtp53在慢性HPH大鼠肺組織中和離體培養(yǎng)的大鼠PASMCs中都有少量表達，低氧刺激可使其表達顯著增高，且其表達從蛋白的轉(zhuǎn)錄水平即開始增加。凋亡相關(guān)基因bcl-2表達則無明顯變化。提

4、示mtp53有可能參與了慢性低壓、低氧性PAH形成過程中的肺小血管結(jié)構(gòu)重建的調(diào)控。CGRP對常氧條件下培養(yǎng)的PASMCs無明顯作用，對低氧條件下培養(yǎng)的大鼠PASMCs的增殖有一定的抑制作用，對PASMCs的凋亡則無任何影響。 以上結(jié)果提示：低氧可以誘導PASMCs發(fā)生增殖反應(yīng)，但不能直接誘導PASMCs凋亡增加。低氧條件下PASMCs的增殖/凋亡失衡可能是PAH和肺小血管重建的原因之一。低氧可以誘導mtp53表達增多，后者可能是