大鼠薄型子宮內膜模型的建立和鑒定.pdf

1、目的:探索宮腔注射無水乙醇建立大鼠薄型子宮內膜實驗模型的方法,并鑒定模型是否成立。
　　 方法:取性成熟未交配雌性具有動情周期的Sprague-Dawley(SD)大鼠25只,隨機分為兩組:對照組5只(10個子宮),實驗組20只(40個子宮)。對照組白宮角處注入生理鹽水,貯留5分鐘,實驗組白宮角處注入95％無水乙醇,分別貯留5分鐘、10分鐘。根據(jù)液體貯留時間不同,實驗組隨機分為5分鐘組、10分鐘組,各10只大鼠(20個子宮)。經(jīng)

2、過兩個動情周期后,取處于動情期大鼠的子宮,測量子宮內膜厚度:若實驗組子宮內膜厚度與對照組相比無變化或者子宮內膜層完全壞死,則造模失敗。若子宮內膜變薄,我們將內膜變薄的子宮歸為造模組,對其HE染色后子宮內膜組織形態(tài)學進行進一步觀察,并采用免疫組織化學法方法檢測角蛋白、波形蛋白、VEGF、ERQ的表達,分析子宮內膜形態(tài)學特點、子宮內膜上皮細胞和間質中細胞再生長情況以及VEGF、ERα表達情況是否符合薄型內膜的特點,從而鑒定模型是否成功建立。

3、
　　 結果:
　　 1.宮腔注射95％無水乙醇經(jīng)過兩個動情周期后,5分鐘組中,1只大鼠死亡,4個子宮的內膜厚度恢復至正常,14個子宮的內膜變薄;10分鐘組中,2只大鼠死亡,8只大鼠子宮內膜層壞死或者子宮全層壞死。
　　 2.與對照組相比:造模組子宮壁全層明顯變薄,子宮內膜層(764.1±100.2μmvs234.6±48.1μm,p＜0.01)較肌層更明顯,且未見明顯波浪形;腺體稀疏,部分腺腔膨大成囊狀,腺上皮

4、及腔上皮細胞呈低柱、立方甚至扁平狀;血管減少,部分管腔膨大。10分鐘組子宮內膜層大部分為無細胞結構區(qū)域,僅存少數(shù)細胞結構輪廓;淺肌層甚至子宮全層壞死,肌層血管擴張,內可見血栓形成。
　　 3.造模組單位內膜面積中角蛋白面積小于對照組(11.46±2.40％vs17.82±2.28％,p＜0.05),差異有統(tǒng)計學意義;造模組單位間質面積中波形蛋白面積小于對照組(8.30±2.84％vs13.62±3.18％,p＜0.05),差異有