Twist調節(jié)乳腺癌細胞轉移分子機制的初步研究.pdf

1、全世界每年約有120萬婦女患乳腺癌，在西歐、北美等發(fā)達國家，乳腺癌發(fā)病率占女性惡性腫瘤首位。值得關注的是，我國是乳腺癌發(fā)病率增長最快的國家之一，近年來乳腺癌發(fā)病率正以每年3％的速度遞增，成為城市中死亡率增長最快的癌癥。乳腺癌患者死亡的最根本原因不是原位瘤的生長而是由于腫瘤的轉移，因此，乳腺癌轉移機制的研究具有重要意義。 Twist是一種bHLH(basic Helix-loop-Helix)類型的轉錄因子，近年來研究發(fā)現(xiàn)，Twi

2、st在乳腺癌中的表達顯著升高，并能促進乳腺癌細胞的侵襲和轉移。為了探索Twist促進乳腺癌轉移的分子機制，本實驗采用RNA干擾技術建立了小鼠乳腺癌細胞4T1的Twist基因沉默細胞株。小鼠體內實驗結果表明，Twist沉默能顯著抑制4T1細胞的肺轉移能力。在此基礎上，利用寡核苷酸基因芯片技術檢測了Twist沉默前后4T1細胞基因表達譜的差異性?；蛐酒治霰砻鳎篢wist沉默前后表達差異顯著的基因有167條，其中與腫瘤相關的基因有26條，

3、包括15條上調基因和1l條下調基因。這些基因可能在Twist引起的腫瘤轉移過程中發(fā)揮重要作用。 鐵離子轉運蛋白24p3是上述26條腫瘤相關基因之一，已有研究表明24p3在一些腫瘤中發(fā)生異常表達，在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中可能發(fā)揮重要作用。上述基因芯片結果顯示Twist沉默能顯著促進24p3的表達，這說明Twist有可能通過調控24p3的表達來影響乳腺癌細胞的轉移。 為了研究24p3在Twist介導的乳腺癌轉移過程中的作用，

4、我們在小鼠乳腺癌細胞株4T1中表達了24p3，建立了24p3過表達的乳腺癌細胞模型，并通過體外實驗檢測了24p3過表達對乳腺癌細胞生物學特性的影響。研究結果表明，24p3過表達對4T1細胞的增殖和克隆形成能力沒有顯著影響，但是顯著增強了4T1細胞的遷移能力。進一步利用小鼠乳腺癌轉移模型檢測24p3對乳腺癌轉移的影響。實驗結果表明，與對照細胞相比，24p3過表達后小鼠原位瘤的重量沒有明顯差異，但肺轉移結節(jié)數(shù)顯著增多。這些結果說明在小鼠乳腺

5、癌細胞中24p3的表達能促進其體內轉移能力，提示24p3的表達程度很可能與乳腺癌的惡性程度密切相關。同時，Twist沉默后24p3表達量被上調，4T1的轉移能力減弱；但是過表達24p3后沒有抑制反而促進4T1細胞的轉移。這些結果說明Twist可能并不是通過調節(jié)24p3的表達來影響乳腺癌的轉移。 綜上所述，本文利用分子生物學和細胞生物學的方法，在分子、細胞和動物水平證明了Twist和24p3在小鼠乳腺癌轉移過程中的作用。本研究結果