RIP1在哮喘氣道上皮細胞壞死性凋亡中的作用.pdf

1、研究背景
　　氣道上皮細胞在啟動和維持支氣管哮喘的氣道慢性炎癥中起著重要作用。支氣管哮喘患者氣道上皮細胞損傷甚至脫落，損傷的氣道上皮細胞通過分泌多種細胞因子和趨化因子，趨化并活化免疫細胞，啟動支氣管哮喘的炎癥反應；而且氣道屏障結構破壞，也促進過敏原與粘膜下層免疫細胞相互接觸，進一步加重氣道的炎癥反應。壞死性凋亡（necroptosis）是一種新發(fā)現的程序性壞死，以細胞器腫脹、細胞膜破裂為特征，RIP1、RIP3和MLKL是其重要的

2、信號分子。近期研究發(fā)現壞死性凋亡在調控機體急慢性炎癥反應中起重要作用。但是，有關壞死性凋亡是否參與支氣管哮喘氣道上皮細胞脫落的研究目前國內外尚未見報道。
　　目的：
　　探討RIP1在支氣管哮喘氣道上皮細胞壞死性凋亡中的作用。
　　方法：
　　本研究采用支氣管哮喘特征性細胞因子IL-13刺激人氣道上皮細胞系HBE體外模擬哮喘環(huán)境，采用流式細胞儀檢測氣道上皮細胞發(fā)生壞死性凋亡的情況，Western-Blot檢測壞死

3、性凋亡重要信號分子的表達變化。
　　結果：
　　1、IL-13誘導氣道上皮細胞發(fā)生壞死性凋亡
　　不同濃度IL-13（40 ng/ml,80 ng/ml,160 ng/ml）刺激HBE，結果顯示IL-13增加HBE PI/Annexin-v雙陽的比例(8.375％±0.6761%vs10.32%±0.5708%,11.62%±0.7117%,15.28%±1.060%,P<0.05，n=8)。RIP1抑制劑Nec-1減

4、少HBE PI/Annexin-v雙陽的比例(15.99%±2.857% vs8.401%±1.111%,P<0.05，n=8).
　　2、RIP1信號通路在哮喘氣道上皮細胞壞死性凋亡中的作用
　　不同濃度IL-13（40 ng/ml,80 ng/ml,160 ng/ml）刺激HBE，結果顯示IL-13上調RIPK1的表達(0.515±0.051 vs0.79±0.091,0.9775±0.1026,1.125±0.0849

5、，P<0.05，n=3)，RIPK3只在IL-13刺激濃度為160ng/ml時表達增加(1.057±0.138 vs1.65±0.0551,P<0.05，n=3)。RIP1抑制劑Nec-1抑制RIPK1(0.9633±0.06936 vs1.313±0.0441，P<0.05，n=3)和RIPK3(0.89±0.09539 vs1.563±0.1475,P<0.05，n=3)的表達。
　　結論：
　　我們的實驗結果說明IL-