釀酒酵母PKA催化亞基的活性比較研究.pdf

1、釀酒酵母的Ras-cAMP信號通路在調(diào)控酵母細(xì)胞代謝、增殖、分化、壓力抗性以及菌絲生長過程中具有重要的作用。蛋白激酶A（PKA）是Ras-cAMP信號通路的主要靶標(biāo)。PKA催化亞基由基因TPK1、TPK2和TPK3編碼，二聚體調(diào)節(jié)亞基由BCY1基因編碼。cAMP和PKA的調(diào)節(jié)亞基結(jié)合，釋放出其催化亞基而激活了PKA。PKA通過負(fù)調(diào)控鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子Msn2/4和蛋白激酶Rim15來調(diào)節(jié)細(xì)胞對壓力的響應(yīng)。PKA活性高的細(xì)胞對熱敏感，而PK

2、A活性低的細(xì)胞對熱有抗性。Yak1處于PKA的下游，受PKA的負(fù)調(diào)控作用，對細(xì)胞的生長有抑制作用。缺失YAK1基因能提高PKA活性。三個TPK基因有靶標(biāo)特異性，但它們在PKA活性方面有什么差異還不清楚。 本文構(gòu)建了缺失一個TPK基因或缺失兩個TPK基因的菌株，對它們的熱擊抗性進(jìn)行比較研究。實驗結(jié)果表明，不同TPK基因表達(dá)產(chǎn)物的協(xié)同作用產(chǎn)生的PKA活性不同。在YAK1基因缺失背景下，TPK2基因表達(dá)產(chǎn)物的PKA活性最高，TPK3基