生物轉(zhuǎn)化法合成糖基抗壞血酸的初步研究.pdf

1、本文對(duì)糖基抗壞血酸的生物合成進(jìn)行了初步研究，以麥芽糖和VC為底物經(jīng)α-葡萄糖苷酶作用得到了VC的糖基衍生物—糖基抗壞血酸，主要研究?jī)?nèi)容包括糖基抗壞血酸高轉(zhuǎn)化率菌株的篩選、發(fā)酵條件及培養(yǎng)基組成的優(yōu)化、糖基抗壞血酸轉(zhuǎn)化條件的優(yōu)化，以及糖基抗壞血酸高轉(zhuǎn)化率菌株的誘變育種。得到結(jié)果如下： 從土壤中篩選到一株糖基抗壞血酸轉(zhuǎn)化率較高的菌株WPD2，通過(guò)菌落形態(tài)和ITS保守區(qū)序列分析及基于ITS的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析，確定該菌為一株黑曲霉，命名為A

2、spergillusnigerWPD2，同時(shí)對(duì)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物作了初步鑒定，確定轉(zhuǎn)化產(chǎn)物中含糖基抗壞血酸。 通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)、PB實(shí)驗(yàn)結(jié)合正交實(shí)驗(yàn)對(duì)AspergillusnigerWPD2發(fā)酵條件及培養(yǎng)基組成進(jìn)行了考察，得到的最佳條件為：接種量為2.0％、搖瓶裝液量為30mL/250mL、培養(yǎng)溫度為34℃、培養(yǎng)時(shí)間為60h、初始pH為7.0、90g/L的麥芽糖為碳源、10g/L的(NH4)2SO4為氮源、CaCl2添加量為0.05g/L，

3、優(yōu)化后糖基抗壞血酸產(chǎn)量達(dá)到0.52g/L，比優(yōu)化前提高了40.5％。 通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)對(duì)糖基抗壞血酸的轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行了考察，得到最佳轉(zhuǎn)化條件為：轉(zhuǎn)化溫度40℃、初始pH2.5、轉(zhuǎn)化時(shí)間14h、VC5g/L、麥芽糖2g/L，優(yōu)化后糖基抗壞血酸產(chǎn)量達(dá)到3.20g/L，比優(yōu)化前提高了515.4％。 采用亞硝基胍誘變育種，得到誘變菌株AspergillusnigerWPD2-N7—3，其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物中糖基抗壞血酸含量達(dá)到3.92g/L，比