磷酸化JNK在高溫致神經(jīng)管畸形中的表達及研究.pdf

1、目的：通過研究高溫致金黃地鼠NTD的動物模型,檢測磷酸化JNK（P-JNK）在高溫致神經(jīng)管畸形中的表達水平，分析其在高溫致神經(jīng)管畸形的表達及意義。方法：成年未經(jīng)產(chǎn)雌性金黃地鼠,于晚19～21時與雄鼠1∶1合籠, 次日做陰道涂片,查有精子者定為受孕第1d。將孕鼠隨機分為實驗組和對照組, 實驗組和對照組又各分為3個小組。實驗組于受精第8天16～17時置42℃水浴,持續(xù)20min,對照組37℃水浴20min。各實驗組孕鼠分別于高溫處理后第9天

2、第10天第11天剖腹取胎,在光學(xué)解剖顯微鏡下迅速剝離神經(jīng)管放置液氮內(nèi)凍存?zhèn)溆?。對照組在相應(yīng)時間取材。用Western blot方法檢測P-JNK在實驗組和對照組神經(jīng)上皮中的表達。結(jié)果：溫度42℃持續(xù)20min時胚胎吸收率和死亡率之和為20%左右，神經(jīng)管發(fā)生率近80%，即幾乎所有活胎均有神經(jīng)管畸形；在預(yù)染蛋白Marker約46kD處，見P-JNK的特異性的蛋白條帶，實驗組各組之間相比明顯有差異（P<0.01），而對照組各組之間相比無差異(