中國(guó)陜西，英國(guó)，印度蘋(píng)果黑星病菌遺傳多樣性的SSR分析.pdf

1、蘋(píng)果黑星病是世界各蘋(píng)果產(chǎn)區(qū)的重要病害之一，主要為害葉片和果實(shí)，造成葉片早期脫落，樹(shù)勢(shì)降低，受害果實(shí)開(kāi)裂畸形，失去商品價(jià)值。對(duì)蘋(píng)果黑星病病菌進(jìn)行研究，有助于了解病菌的傳播及病害發(fā)生，發(fā)展和流行的規(guī)律。本文應(yīng)用SSR分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)蘋(píng)果黑星病病菌的遺傳多樣性進(jìn)行了研究，取得了以下結(jié)果： 1.對(duì)21對(duì)蘋(píng)果黑星病菌特異性引物進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果表明，有3對(duì)引物對(duì)供試蘋(píng)果黑星病菌株標(biāo)記不出多態(tài)性位點(diǎn)；有18對(duì)引物可以標(biāo)記出，其中6對(duì)引物標(biāo)記的多

2、態(tài)性位點(diǎn)較為豐富，證明這18對(duì)引物可以應(yīng)用于蘋(píng)果黑星病菌SSR標(biāo)記的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。 2.建立了18對(duì)引物應(yīng)用于蘋(píng)果黑星病菌SSR標(biāo)記的反應(yīng)體系。確定的最適反應(yīng)體系為：10μL體系中，10×Buffer 1μL，MgCl2(25 mmol/L)0.7μL，dNTPs(10 mmol/L)0.16μL，引物(1μmol/L)4μL，Taq DNA聚合酶(1U)0.1μL，DNA模板(1 mg/L)1μL，ddH20 3.04μL。P

3、CR擴(kuò)增程序?yàn)?4℃ 5 min 1個(gè)循環(huán)；94℃ 40s，Ta℃ 40s，72℃40s 30個(gè)循環(huán)；72℃，10min。經(jīng)多次擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)證明，該反應(yīng)體系具有重復(fù)性和穩(wěn)定性。 3.采用SSR分子標(biāo)記技術(shù)分析了來(lái)源于中國(guó)陜西、英國(guó)和印度共110個(gè)蘋(píng)果黑星病菌株的遺傳多樣性。結(jié)果表明，陜西菌株與英國(guó)菌株親緣關(guān)系較近，與印度菌株親緣關(guān)系稍遠(yuǎn)；印度菌株內(nèi)互相之間親緣關(guān)系非常近；個(gè)別菌株有較大程度的變異，有較大程度的遺傳多樣性：菌株間的遺傳