益生菌干預對危重患者腸道菌群及臨床預后的影響.pdf

1、背景：
　　腸道是全身最大的免疫器官，由腸道菌群、腸粘膜上皮、腸道免疫系統構成。腸道菌群是由大量微生物組成的復雜的生態(tài)系統，與宿主的生長、發(fā)育、物質代謝和衰老緊密相關。在創(chuàng)傷、手術、燒傷、嚴重感染等導致的應激反應下，腸道菌群的數量與構成嚴重失衡，伴有腸道屏障功能破壞及免疫紊亂，腸道形成“未引流的膿腫”，繼而發(fā)生細菌移位(bacteria translocation: BT)，導致全身炎癥反應綜合征（systemic inflamm

2、atory response syndrome: SIRS）、多器官功能障礙（multiple organ dysfunction syndrome:MODS）甚至死亡。在針對危重患者的醫(yī)療干預過程中，抗生素的使用、營養(yǎng)方式的改變加重腸道微生態(tài)的紊亂，促進疾病進展及各種并發(fā)癥的發(fā)生。
　　根據WHO定義，益生菌是由生理性活菌或/和死菌組成的微生態(tài)制劑，有益于宿主健康和正常生理功能。它們可以通過代謝產物、免疫調節(jié)、營養(yǎng)競爭、占位作用

3、、分泌細菌素等機制抑制潛在致病微生物，同時增強腸道屏障功能，恢復其正常的結構與功能，維護腸道微生態(tài)的穩(wěn)定。在抗生素濫用、耐藥問題不斷加重的背景下，益生菌特有的接近生理模式的抗菌作用及免疫調節(jié)能力更為突出。目前已有研究表明益生菌干預可減少危重患者的院內感染風險，改善預后。本課題通過前瞻性臨床試驗，研究益生菌干預下內科危重患者腸道菌群的改變及臨床收益。
　　目的：
　　1.采取臨床隨機對照試驗方法，前瞻性研究益生菌干預下內科危重

4、患者臨床癥狀及預后的差異，結合腸道菌群的改變，確立腸道微生態(tài)與危重患者臨床預后的關系。
　　2.通過對糞便標本中腸道代表細菌定量檢測，研究危重患者入院之后腸道細菌數量及構成的改變;干預組進行比較，研究益生菌干預對內科危重患者腸道菌群的影響。
　　3.動態(tài)評估腸道粘膜屏障功能在危重患者中的變化，探討益生菌對腸道屏障功能的維護作用。
　　4.研究在疾病進展過程中益生菌干預對危重患者炎癥狀態(tài)及免疫功能的影響。
　　方法

5、：
　　1.呼吸重癥監(jiān)護室新入院病人作為研究對象，依照納入標準確定研究樣本。采取隨機分組、單盲方法。從入組開始干預組予以益生菌（酪酸梭菌），對照組為空白對照，直至患者好轉出院或死亡。
　　2.在入院第1天、第15天采集研究對象糞便、血液樣本;提取糞便細菌基因組DNA，采用Realtime-qPCR定量檢測腸道代表細菌;ELISA方法測定外周血清二胺氧化酶（diamine oxidase:DAO）、IL-10、TNF-a及LP

6、S濃度，評估患者腸道粘膜通透性、內毒素血癥水平、炎癥狀態(tài)。前后動態(tài)觀察的同時，通過組間比較顯示益生菌干預的作用。
　　3.隨訪患者相關臨床表現（消化道不良反應、住院期間發(fā)熱天數）;收集患者臨床結局指標（病死率、住院時間、住院費用、抗生素使用時間）進行組間比較。
　　結果：
　　1.合計61人納入研究，1人失訪。對照組與干預組在基線水平、侵襲性操作、制酸劑使用等方面均無顯著性差異。對照組與干預組的病死率無顯著差異(21.

7、21％ vs21.43％，p=0.98)。兩組間的住院天數、抗生素使用時間、住院總費用、抗菌素費用、血流感染發(fā)生率均無顯著性差異。
　　2.干預組便秘發(fā)生率較對照組顯著降低(17.86％ vs42.42％，p=0.04);住院期間發(fā)熱天數（％總住院天數）在對照組與干預組存在顯著性差異(12.94％ vs4.85％, p=0.00)。
　　3.腸道代表菌群定量在基線水平無顯著差異。入院后第15天干預組擬桿菌水平較對照組顯著降低

8、(△m=-0.69，p=0.048)，大腸桿菌與腸球菌均呈下降趨勢(△m=-0.65，p=0.08;△m=-0.52，p=0.22)。雙歧桿菌與乳酸桿菌水平在組內前后及組間均無顯著差別。
　　4.DA0基線水平無明顯差異，入院后均顯著升高(β1=66.18，p＜0.01;β2=70.43，p＜0.01)。d15DAO水平在組間無顯著性差異(△m=7.14，p=0.62)。LPS、IL-10、TNF-a基線水平無明顯差異。對照組入院

9、后LPS無明顯變化(β1=0.88，p=0.96)，干預組明顯降低(β2=-39.18，p=0.002)。d15兩組LPS無顯著性差異(△m=-16.50，p=0.38)。入院后兩組IL-10均顯著升高(β1=87.85，p=0.01;β2=58.96，p=0.03)。d15兩者無顯著性差異(△m=-30.04，p=0.41); TNF-a前后改變及組間比較均無明顯變化。
　　結論：
　　1.本研究結果未能提示益生菌可以改善

10、呼吸科危重患者臨床終點結局（病死率、血流感染發(fā)生率、住院時間、抗生素使用時間、住院費用、抗菌素費用）。益生菌干預可有效改善危重患者住院期間便秘的癥狀。
　　2.益生菌干預有效減少危重患者腸道擬桿菌水平，同時有抑制大腸桿菌、腸球菌趨勢。但多種因素影響益生菌在內科危重患者中的作用效果，導致其對腸道菌群的影響輕微。這可能是臨床預后未能獲得改善的原因之一。
　　3.入院后患者腸道粘膜受損，未能被益生菌干預所糾正;但益生菌可減輕內毒素