鼠疫耶爾森氏菌基因表達譜技術平臺的建立與應用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:建立細菌表達譜分析技術平臺;初步將此技術應用于鼠疫耶爾森氏菌基因表達譜的研究,為鼠疫耶爾森氏菌功能基因組研究奠定基礎:(1)磁捕獲雜交法提取和純化細菌mRNA方法的建立;(2)基于DNA芯片的基因表達譜分析技術平臺的建立與評價;(3)溫度調(diào)節(jié)鼠疫耶爾森氏菌基因表達譜分析的研究;(4)實時定量RT-PCR對表達譜技術的評價.方法:利用磁珠捕獲雜交法從總RNA中除去rRNA,再用乙醇沉淀純化得到mRNA;從對各實驗條件的探索行細菌DN

2、A芯片表達譜技術平臺的搭建與優(yōu)化,用實時定量RT-PCR對此技術平臺進行評價;通過改變培養(yǎng)溫度模擬鼠疫耶爾森氏菌感染哺乳動物宿主時微環(huán)境的變化,研究其可能的致病相關基因.選取15條基因用實時定量RT-PCR對表達譜分析結果進行評價.結果:(1)建立了磁珠捕獲雜交法提取和純化細菌mRNA的方法;(2)搭建了基于DNA芯片的細菌表達譜技術平臺;(3)發(fā)現(xiàn)401個不同溫度條件下差異表達的基因,鼠疫耶爾森氏菌的許多重要基因的表達發(fā)生了變化,如編

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