抑郁大鼠模型外周血5-羥色胺相關因素與中樞的關聯探討.pdf

1、目的：探討急慢性應激抑郁動物模型5-羥色胺(5-HT)相關指標(5-HT水平、5-HT受體、5-HT轉運體(Arango，Underwood et al.)、色氨酸羥化酶2(TPH2)、腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)在外周血與中樞的變化；探討5-羥色胺相關指標外周血與中樞的關聯性；探討西酞普蘭對慢性應激大鼠5-羥色胺相關指標的影響；探討慢性應激大鼠的認知功能及與5-HT指標的關聯。
　　 方法：實驗分急性電擊應激試驗與慢性應激試

2、驗兩部分。試驗后均取大鼠血樣與腦組織(海馬、前額葉、中縫核及紋狀體)，采用高效液相色譜儀檢測(HPLC)或ELISA技術檢測血小板/血漿5-HT及BDNF水平，采用TaqMan技術檢測5-HT相關指標的mRNA表達。
　　 第一部分：采用電擊誘導急性應激模型，將16只SD大鼠隨機分為急性應激組與對照組，每組8只，應激組經3天每天1次40分鐘的電擊誘導，采用曠場試驗評價大鼠行為，安樂處死，取血樣與腦組織(海馬、前額葉、中縫核及紋狀

3、體)低溫保存后檢測。
　　 第二部分：采用慢性不可預計輕度應激(CUMS)模型，將24只SD大鼠隨機分為3組：A對照組、B應激不用藥組、C應激用藥組。A組不予刺激，每天腹腔注射生理鹽水2ml；B組每天予刺激1-2種，腹腔注射生理鹽水2ml；C組每天予刺激1-2種，腹腔注射西酞普蘭10mg/kg。每周稱重，每3周測糖水偏愛性、曠場試驗評價大鼠行為，6周后安樂處死，之前采用新異物體識別度評價大鼠認知功能。取血樣與腦組織低溫保存后檢測

4、。
　　 結果：第一部分：1、電擊誘導的急性應激大鼠行動減少；2、電擊誘導的急性應激大鼠外周血5-HT及BDNF水平未見明顯改變；3、電擊誘導應激大鼠血中BDNF的mRNA表達水平與對照組相比顯著降低(0.62±0.27 vs1.30±0.39，p<0.01)；BDNF的mRNA表達外周血與中樞之間未顯示相關；4、電擊誘導應激大鼠5-HT2a受體的mRNA表達在海馬、中縫核、紋體體中均降低(分別是0.35±0.28vs2.00±

5、2.14，0.22±0.16 vs7.98±19.62；0.23±0.17 vs24.09±60.48)；5、血小板及血漿5-HT水平與動物曠場行為數據未顯示相關；6、血小板及血漿5-HT水平與中樞5-HT相關指標的mRNA表達未顯示相關；7、對照鼠TPH2在外周血的mRNA表達與動物曠場行為可能相關(例如與動物曠場移動總距離的相關系數r=0.929)，TPH2在外周血與前額葉的表達間可能相關(r=-0.488)。
　　 第二部

6、分：1、對照組意外死亡1只；2、B組與A組及C組大鼠比較，糖水偏愛度顯著降低(均值分別為60％，73％，71％)且行為增多；3、B組及C組與A組相比，體重增長明顯較少(均數分別是156.30g，132.49g，240.91g)；4、新異物體識別度C組最低，與B組相比接近顯著差異水平(A、B、C三組分別為0.65±0.15、0.60±0.26、0.33±0.33，B組與C組比較p=0.08)；5、A、B、C三組血小板5-HT水平分別為14

7、73.38±390.98、1559.00±424.41、684.15±335.6490ng/109，A組與C組、B組與C組比較有顯著差異(p<0.01)；6、血小板與血漿5-HT水平與動物行為未顯示相關，與中樞5-HT相關指標的表達未顯示相關；7、外周血TPH2的mRNA表達與動物行為存在關聯，TPH2的mRNA表達在外周血與前額葉及紋狀體存在關聯(r分別為0.484及0.449)；8、A、B、C三組大鼠血漿BDNF水平比較無顯著差異，

8、BDNF的mRNA表達外周血與中樞之間未顯示相關。
　　 結論：1、急慢性應激未引起大鼠血小板與血漿5-HT水平改變，血小板與血漿5-HT水平不能作為反應抑郁狀態(tài)的指標，與中樞5-HT相關指標的表達也未見相關。2、西酞普蘭給藥降低應激大鼠的血小板5-HT水平，血小板5-HT水平可能成為藥效評價的生物標記物。3、外周血TPH2的mRNA表達與動物行為存在關聯，TPH2的mRNA表達在外周血與前額葉存在關聯，提示TPH2的mRNA表