腫瘤壞死因子α前體轉(zhuǎn)換機(jī)制的探討及TACE抑制劑的研究.pdf

1、華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文腫瘤壞死因子α前體轉(zhuǎn)換機(jī)制的探討及TACE抑制劑的研究姓名：朱孔黎申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：楊渝珍2001.5.1、華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文腫瘤壞死因子n前體轉(zhuǎn)換機(jī)制的探討及TACE抑制劑的研究研究生導(dǎo)師摘要朱孔黎楊渝珍目的j探討腫瘤壞死因子也前體轉(zhuǎn)換的機(jī)制并研究TACE的底物模擬肽對(duì)TACE的差異抑制。仿法1L以體外培養(yǎng)的HL60細(xì)胞系為模型，用大腸桿菌內(nèi)毒素(L

2、PS)分時(shí)相直接刺激細(xì)胞后，提取HL60細(xì)胞總RNA，標(biāo)記8TN]FⅡ、MMP9和TACEDNA探針，進(jìn)行RNADNA斑點(diǎn)雜交。同時(shí)提取HL60全細(xì)胞蛋白質(zhì)，分別進(jìn)行DotELISA和免疫印跡分析。2用MTT比色法觀察特異性TACE底物模擬肽對(duì)HL60細(xì)胞分泌TNFd的影響，體外篩選抑制劑。3以20克左右的昆明小鼠制作動(dòng)物內(nèi)毒素休克模型，首先觀察LPS的血液濃度動(dòng)態(tài)曲線；其次取小鼠腹腔巨噬細(xì)胞進(jìn)行FCM，并以SABC法進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢