大黃魚選育群體SSR遺傳多樣性分析、耐低溫分子標記篩選和耐低溫基因CIRP表達.pdf

1、大黃魚（Pseudosciaena crocea）隸屬鱸形目、石首魚科、黃魚屬，是我國重要的海水網箱養(yǎng)殖魚類。因浙江養(yǎng)殖海區(qū)冬季水溫較低，每年有大黃魚被凍死，養(yǎng)殖戶每年或多或少有經濟損失。為此，項目組成員通過人工選育獲得了耐低溫能力強的大黃魚“東海1號”。本研究針對該大黃魚選育群體進行遺傳多樣性分析和耐低溫相關分子標記篩選，以及克隆耐低溫基因CIRP并分析其在低溫脅迫下的組織表達情況。
　　遺傳多樣性分析表明，選育群體的平均觀測雜

2、合度、平均期望雜合度和多態(tài)信息含量分別為0.681、0.657和0.596，表明其遺傳多樣性較高，具備進一步遺傳育種的潛力，但應給與保護，避免遺傳多樣性進一步丟失。選育群體中兩個不同低溫耐受群體的平均等位基因數為4.454~4.546，平均觀測雜合度為0.677~0.685，平均期望雜合度為0.653~0.661，多態(tài)信息含量為0.591~0.601，兩個群體間的遺傳多樣性水平相當，表明耐低溫性狀差異可能不會導致群體間的遺傳分化。

3、>　　微衛(wèi)星分析結果顯示，標記 KPC43在選育群體的2組大黃魚樣品中擴增出2個差異顯著的等位基因（片段大小分別為170 bp和150 bp），其中KPC43170bp差異等位基因在低溫耐受組中出現的頻率顯著高于低溫敏感組，與耐低溫性狀存在極顯著的正相關（P<0.01），相關系數達到0.498**；KPC43150bp差異等位基因在低溫敏感組中出現的頻率顯著高于低溫耐受組，與耐低溫性狀存在極顯著負相關（P<0.01），相關系數達到-0.

4、417**。表明這2個差異等位基因可能與某種耐低溫基因存在一定的連鎖關系。對這2個差異等位基因進行序列比對發(fā)現 KPC43170bp在核心序列位置比KPC43150bp多了10個（TG）重復，由此推測可能是不耐低溫個體（TG）重復次數較少而影響了某個耐低溫基因的表達活性，從而影響其耐低溫能力。
　　基因克隆結果顯示，大黃魚CIRP基因cDNA序列全長1211 bp（含polyA尾），含一個較小的開放閱讀框，編碼182個氨基酸。RT