凋亡對(duì)海馬損傷后齒狀回細(xì)胞增殖的調(diào)控.pdf

1、目的：探討成年大鼠海馬損傷后，齒狀回(dentate gyrus，DG)增殖的新生細(xì)胞減少的機(jī)制及增殖的新生細(xì)胞對(duì)學(xué)習(xí)記憶的影響。 方法：用海人酸(kainic acid，KA)建立海馬損傷模型；用5-溴脫氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine，BrdU)標(biāo)記海馬DG增殖的新生細(xì)胞：用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)DG BrdU陽(yáng)性細(xì)胞，并用無(wú)偏差體視學(xué)方法定量分析：用激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)BrdU與cleaved

2、caspase-3的共表達(dá)；Western Blot檢測(cè)海馬齒狀回凋亡相關(guān)蛋白caspase-3、p53的表達(dá)水平；用Y迷宮訓(xùn)練成績(jī)?cè)u(píng)價(jià)學(xué)習(xí)記憶的能力。 結(jié)果：免疫組化結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物在損毀海馬后各時(shí)間點(diǎn)DG BrdU陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)均比對(duì)照組明顯增多；BrdU陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)在標(biāo)記后第1d最多，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸減少；在顆粒細(xì)胞層和門區(qū)均有少量BrdU+/cleaved caspase-3+共表達(dá)的陽(yáng)性細(xì)胞。Western Blot

3、結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物的caspase-3酶原條帶與對(duì)照組相比減弱，實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物p53蛋白的表達(dá)水平比對(duì)照組增高。Y迷宮訓(xùn)練結(jié)果顯示BrdU標(biāo)記后6～8d、18～20d實(shí)驗(yàn)組錯(cuò)誤次數(shù)(error number，EN)均較對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組增多，BrdU標(biāo)記后25～27d實(shí)驗(yàn)組EN接近對(duì)照組。 結(jié)論：海馬損毀能促進(jìn)海馬DG的細(xì)胞增殖；DG增殖的新生細(xì)胞的數(shù)量隨著時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸減少，減少的原因之一是出現(xiàn)了凋亡性程序性細(xì)胞死亡；動(dòng)物對(duì)損毀海