氧化苦參堿逆轉(zhuǎn)人乳腺癌多藥耐藥細胞株MCF-7-ADM耐藥的研究.pdf

1、目的：研究中藥天然有效成分氧化苦參堿(Oxy)對耐藥細胞株MCF-7/ADM的逆轉(zhuǎn)作用及逆轉(zhuǎn)機制。
　　 方法：1.利用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測不同梯度濃度的Oxy對MCF-7/ADM和MCF-7/S的抑制率，確定Oxy的非細胞毒性濃度和試驗濃度。
　　 2.分別利用MTT法檢測ADM、VCR和Taxol對MCF-7/ADM和MCF-7/S的半數(shù)抑制濃度IC50，確定MCF-7/ADM的多藥耐藥性。
　　

2、3.分別利用MTT法檢測加入Oxy后，ADM、VCR和Taxol對MCF-7/ADM的半數(shù)抑制濃度IC50，觀察其逆轉(zhuǎn)效果。
　　 4.流式細胞儀(FCM)檢測加入Oxy前后MCF-7/ADM胞內(nèi)ADM的熒光強度及胞膜上P-糖蛋白(p-glycoprotein，P-gP)的表達，探討其逆轉(zhuǎn)機制。
　　 結(jié)果：1.濃度小于0.75mg/ml的Oxy對MCF-7/ADM無明顯細胞毒性。
　　 2.ADM對MCF-7/

3、S和MCF-7/ADM的IC50分別為0.68μg/ml和51.57μg/ml，耐藥倍數(shù)約75.84倍，Oxy作用后ADM對MCF-7/ADM的IC50降低為8.36μg/ml，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)約為6.26倍；VCR對MCF-7/S和MCF-7/ADM的IC50分別為0.29μg/ml和11.38μg/ml，耐藥倍數(shù)約39.24倍，Oxy作用后VCR對MCF-7/ADM的IC50降低為0.98μg/ml，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)為12.44倍；Taxol對MC

4、F-7/S和MCF-7/ADM的IC50分別為0.19μg/ml和6.45μg/ml，耐藥倍數(shù)約33.95倍，Oxy作用后Taxol對MCF-7/ADM的IC50降低為0.63μg/ml，逆轉(zhuǎn)倍數(shù)約為10.90倍。
　　 3.加入0.75mg/ml的Oxy后MCF-7/ADM胞內(nèi)ADM濃度提高至原來的2～4倍；Oxy作用前后細胞膜上P-gP蛋白表達的熒光強度值分別為39.987士0.693和20.016士0.318，兩者間差異有