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1、第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文白細(xì)胞介素2與雌激素對(duì)C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的作用姓名:周華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):生理學(xué)指導(dǎo)教師:朱運(yùn)龍20020101第四軍醫(yī)大薯u一士掌口瞪文中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能具有廣泛而重要的作用。雌激素調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)功能往往通過(guò)雌激素受體(es廿ogenreceptor,ER)蛋白介導(dǎo)。ER屬于類(lèi)固醇受體超家族的核受體,具a、D兩種亞型,此二者在各種組織分布及密度迥異。ER具核、膜雙重分布特征。雌激素的作用通過(guò)經(jīng)典的核受體通路和
2、膜受體通路來(lái)完成。星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中數(shù)量最多的一種細(xì)胞,對(duì)維持神經(jīng)系統(tǒng)正常生理功能發(fā)揮至關(guān)重要的作用。星形膠質(zhì)瘤是腦部常見(jiàn)惡性腫瘤之一。本次研究擬從基因與蛋白水平系統(tǒng)的證實(shí)c6大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞有IL2R與ER表達(dá),并分別初步探討IL2與雌激素對(duì)該細(xì)胞基本生理活動(dòng)的影響,及其可能的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。本實(shí)驗(yàn)第一部分首先觀察了IL一2R在c6細(xì)胞的表達(dá)狀況,而后觀察IL2對(duì)C6神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖活動(dòng)的影響。第二部分觀察了ER在該細(xì)胞的表
3、達(dá)情況與E2對(duì)細(xì)胞基本生理活動(dòng)的影響。本實(shí)驗(yàn)采用的方法如下:1c6大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系的培養(yǎng);2免疫細(xì)胞化學(xué)反應(yīng):從蛋白水平檢測(cè)IL一2R與ER的表達(dá);3westem免疫印記:檢測(cè)ER蛋白的表達(dá);4從培養(yǎng)的C6細(xì)胞中提取總RNA:5將上述總RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA在進(jìn)行PcR擴(kuò)增,以確定是否有IL2RmRNA與ERmRNA的表達(dá);6采用MTT法觀察IL一2與E2對(duì)細(xì)胞A490fl。處OD值的影響;7采用3HTdR摻入法檢測(cè)IL一2與E2對(duì)細(xì)
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