綠原酸對(duì)氧化應(yīng)激損傷人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞保護(hù)作用的分子機(jī)制.pdf

1、分類(lèi)號(hào)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：406521411262南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文綠原酸對(duì)氧化應(yīng)激損傷人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞綠原酸對(duì)氧化應(yīng)激損傷人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞保護(hù)作用的分子機(jī)制保護(hù)作用的分子機(jī)制Protectiveeffectofchlogenicacidagainstoxidativestressinhumanretinalpigmentepithelialcellsthemolecularmechanisminvolvedinthi

2、sprotection鄒玉凌鄒玉凌培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱(chēng)：游志鵬教授、主任醫(yī)師申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門(mén)類(lèi)：醫(yī)學(xué)學(xué)科專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)：眼科學(xué)論文答辯日期：2014年6月答辯委員會(huì)主席：易敬林評(píng)閱人：俞方良廖洪斐2014年5月摘要II摘要目的：目的：觀察綠原酸（CGA）對(duì)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(ARPE19)的保護(hù)作用，通過(guò)觀察視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞在過(guò)氧化氫處理后細(xì)胞凋亡相關(guān)分子的表達(dá)變化，探討綠原

3、酸對(duì)氧化應(yīng)激的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的抗凋亡作用及其可能的分子機(jī)制，為將來(lái)臨床上利用綠原酸治療年齡相關(guān)性黃斑變性等與氧化應(yīng)激相關(guān)的眼病提供理論依據(jù)。方法：方法：1、參考國(guó)外相關(guān)文獻(xiàn)，以500uM濃度的過(guò)氧化氫(H2O2)作用于ARPE19人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞24h，建立氧化應(yīng)激損傷模型。2、WST1細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)綠原酸對(duì)ARPE19人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的毒性，綠原酸處理細(xì)胞24h后待檢。3、實(shí)驗(yàn)分三組：正常對(duì)照組，過(guò)氧化氫建模組，綠原酸保

4、護(hù)組。WST1細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞存活率。4、采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)每個(gè)實(shí)驗(yàn)組ARPE19細(xì)胞的凋亡率。5、通過(guò)RTPCR檢測(cè)每個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的Bcl2和Caspase3基因表達(dá)水平。6、通過(guò)Westernblot檢測(cè)每個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的Bcl2和Caspase3蛋白表達(dá)水平。結(jié)果：結(jié)果：1、不同濃度的CGA（12.5uM，25uM50uM100uM200uM）處理ARPE19人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞24h后，各實(shí)驗(yàn)組ARPE19細(xì)胞的相對(duì)細(xì)胞活

5、力（cellviability）與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；說(shuō)明0~200uM濃度的CGA對(duì)ARPE19人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞沒(méi)有表現(xiàn)出明顯的毒性作用。2、各實(shí)驗(yàn)組的相對(duì)細(xì)胞活力H2O2建模組低于對(duì)照組（P＜0.05），50uM100uM200uM的CGA保護(hù)組高于H2O2建模組（P＜0.05）；說(shuō)明H2O2能夠誘導(dǎo)ARPE19人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷，而CGA具有保護(hù)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的ARPE19人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷