Wnt信號傳導通路異常激活及E-cadherin-catenins復合體異常表達與胃癌浸潤轉移關系的研究.pdf

1、目的：胃癌 (Gastric Carcinoma) 是我國最為常見的消化道惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率位居我國惡性腫瘤的首位。為提高胃癌患者的治療效果，應對其發(fā)生和發(fā)展機制進行更深一步的研究。Wnt信號傳導通路是一種對細胞增殖和分化具有重要調節(jié)作用的信號傳導系統(tǒng)，越來越多的研究證明，Wnt通路除了參與調控發(fā)育過程以外，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展也有著密切的關系。該傳導通路的關鍵因子β-catenin同時還作為E-cadherin/catenin

2、s復合體的成員調節(jié)細胞間的黏附。本課題通過研究Wnt信號傳導通路及E-cadherin/catenins復合體所涉及的Wnt2、β-catenin、α-catenin、E-cadherin在胃癌組織、癌旁組織及正常胃粘膜中的表達情況，探討Wnt信號傳導通路與E-cadherin/catenins復合體的關聯(lián)性，并進一步探討這幾種蛋白在胃癌發(fā)生、發(fā)展及浸潤、轉移過程中的作用以及它們之間的相關性，為臨床診療與判斷預后提供有價值的分子指標。

3、 方法： 1 應用免疫組織化學 (immunohistochemistry，IHC)S-P法檢測了62例胃癌組織、35例癌旁組織和22例正常粘膜中Wnt2、β-catenin、α-catenin、E-cadherin的表達情況。 2 應用流式細胞術(Flow Cytometrye，F(xiàn)CM)的方法定量檢測30例胃癌組織、15例癌旁組織和15例正常胃粘膜組織中 Wnt2、β-catenin的含量。 3 運用統(tǒng)計軟件SP

4、SS11.5對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。 結果：1 正常胃粘膜、癌旁組織、胃癌組織中β-catenin的胞膜表達強度呈下降趨勢，而胞漿的表達強度呈上升趨勢，三組之間差異有顯著性(P<,膜><0.01；P<,漿><0.01)；分別將β-catenin的胞膜表達和胞漿表達進行組間兩兩比較，差異均有顯著性(P<0.05)。β-catenin胞膜的異常表達與腫瘤的浸潤深度(P<0.05)、淋巴結轉移(P<0.01)有關，而與病理分級、臨床分期以

5、及患者的年齡、性別無關 (P>0.05)；β-catenin胞膜的異常表達與腫瘤的浸潤深度 (P<0.05)、淋巴結轉移 (P<0.01)有關，而與病理分級以及患者的年齡、性別無關 (P>0.05)。 應用FCM法檢測β-catenin在細胞內的總含量，正常粘膜組、癌旁組和胃癌組的β-catenin表達量的FI值(x±s)分別為1.00±0.06、0.97±0.05和0.88±0.07，三組相比有顯著性差異(P<0.01)。胃癌

6、組織中β-catenin的總含量低于正常組與癌旁組(P<0.01)，而正常組與癌旁組相比無顯著性差異(P>0.05)。 2 Wnt2在胃癌組織中高表達，而在正常粘膜與癌旁組織中表達很低，三組相比有顯著性差異(P<0.01)；將三組間進行兩兩比較，胃癌組Wnt2的表達明顯高于正常組(P<0.01)與癌旁組(P<0.05)，正常組與癌旁組相比差異也有顯著性(P<0.01)。Wnt2的表達與腫瘤的浸潤深度(P<0.01)有關，而與淋巴

7、結轉移、臨床分期、病理分級以及患者的年齡、性別均無關 (P>0.05)。 應用FCM法對Wnt2進行檢測，Wnt2在正常粘膜組、癌旁組和胃癌組的FI值(x±s)分別為1.00±0.11、1.08±0.65和4.95±1.54，三組相比有顯著性差異(P<0.01)；癌組織中Wnt2的表達明顯高于正常組和癌旁組(P<0.01)，而正常組與癌旁組相比無顯著性差異(P>0.05)。 3 E-cadherin在正常組、癌旁組、胃癌

8、組中的表達量呈下降趨勢，并且三組相比有顯著性差異(P<0.01)；進行三組間的兩兩比較，可見正常組分別與胃癌組及癌旁組相比，差異有顯著性(P<0.01)，而癌旁組與胃癌組相比，無顯著性差異(P>0.05)。E-cadherin的異常表達與腫瘤的浸潤深度(P<0.05)、淋巴結轉移(P<0.01)、病理分級(P<0.05)、臨床分期(P<0.01)有關，而與患者的年齡、性別無關(P>0.05)。 4 在正常粘膜組、癌旁組、胃癌組中

9、，α-catenin的表達量呈下降趨勢，并且三組相比有顯著性差異(P<0.01)。進行組間兩兩比較，正常組與胃癌組、癌旁組與胃癌組、正常組與癌旁組相比，差異均有顯著性(P<0.01)。α-catenin的異常表達除與病理分級有關外(P<0.01)，與腫瘤的浸潤深度、淋巴結轉移、臨床分期以及患者的年齡、性別均無關(P>0.05)。 5 應用Spearman等級相關分析，Wnt2的表達與β-catenin的胞漿表達呈明顯正相關(P<

10、0.01)，而與β-catenin的膜表達，E-cadherin的膜表達及α-catenin的膜表達均無相關性，但卻能呈現(xiàn)出負向趨勢 (α-catenin除外)；E-cadherin的表達與β-catenin的胞漿表達呈明顯負相關(P<0.01)，而與β-catenin的胞膜表達呈正相關(P<0.05)；E-cadherin膜表達的減少或消失與α-catenin的膜表達減少呈明顯正相關 (P<0.01)；α-catenin與β-cate

11、nin的膜表達呈正相關(P<0.05)，而與β-catenin的胞漿表達呈負相關(P<0.05)。 結論：1．Wnt通路中的信號蛋白Wnt2在胃癌組織的表達較正常胃粘膜及癌旁組織明顯上調，β-catenin的胞膜表達減弱或消失、胞漿內積聚也明顯增加，表明Wnt通路在胃癌中處于激活狀態(tài)，提示該傳導通路的異常激活與胃癌的發(fā)生關系密切。 2．在胃癌組織中，Wnt2表達的上調與β-catenin的胞漿內積聚呈明顯正相關，提示信號

12、蛋白Wnt2的表達上調可能是導致β-catenin在胞漿內積聚的原因之一，并且β-catenin的胞漿積聚與腫瘤的浸潤深度、淋巴結轉移、臨床分期有關，提示β-catenin的這種異常分布與胃癌的惡性表型有關，并在侵襲和轉移中起重要作用。 3．E-cadherin在胃癌組織中的表達量明顯低于正常粘膜及癌旁組織，提示 E-cadherin的異常表達與胃癌的發(fā)生有關。同時，E-cadherin 的異常表達與腫瘤浸潤深度、淋巴結轉移、病

13、理分級、臨床分期均有關，提示其異常表達可能在癌細胞的播散方面起重要作用，從而使其對胃癌患者的轉移風險預測具有潛在的價值。 4．α-catenin在胃癌組織中的表達量明顯低于正常粘膜及癌旁組織，提示α-catenin的異常表達與胃癌的發(fā)生有關。但α-catenin的異常表達與腫瘤的浸潤深度、淋巴結轉移、臨床分期均無關。 5．E-cadherin除作為E-cadherin/catenins復合體的成員之一參與細胞粘附作用外，